【摘 要】
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为获得具有热稳定性的天冬氨酸激酶,从极端嗜热菌Thermus thermophilusHB27基因组中扩增出天冬氨酸激酶(AK)基因,构建重组质粒,并在Escherichia coli BL21(DE3)中进行表达,得到了较高
【机 构】
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苏州大学金螳螂城市建设学院,苏州大学医学部基础医学与生物科学学院,浙江清华长三角研究院
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为获得具有热稳定性的天冬氨酸激酶,从极端嗜热菌Thermus thermophilusHB27基因组中扩增出天冬氨酸激酶(AK)基因,构建重组质粒,并在Escherichia coli BL21(DE3)中进行表达,得到了较高的表达量。经热处理纯化后测定重组天冬氨酸激酶(tAK)的最适pH为7.5,最适反应温度为80℃,80℃半衰期是18h。酶动力学分析表明tAK的Km^ATP为0.23mmol/L,Vmax^ATP为840.34nmol/(L·min),Km^Asp为0.95mmol/L,Vm
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