【摘 要】
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为研究黑豆皮花青素抑制酪氨酸酶催化反应的动力学机制,在不同条件下研究黑豆皮花青素对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的抑制特性,确定最佳抑制条件、抑制类型和半抑制浓度(IC50),并使用紫外和荧光光谱分析二者的相互作用机制.正交试验分析表明:黑豆皮花青素对酪氨酸酶单酚酶的最佳作用条件为黑豆皮花青素浓度0.6mg·mL-1、L-酪氨酸浓度6 mmol·L-1、温度37℃、时间15 min,此时抑制率高达50.37％;对二酚酶的最佳作用条件为黑豆皮花青素浓度0.8mg·mL-1、L-多巴浓度6mmol·L-1、温度35℃
【机 构】
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吕梁学院生命科学系,山西吕梁033000
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为研究黑豆皮花青素抑制酪氨酸酶催化反应的动力学机制,在不同条件下研究黑豆皮花青素对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的抑制特性,确定最佳抑制条件、抑制类型和半抑制浓度(IC50),并使用紫外和荧光光谱分析二者的相互作用机制.正交试验分析表明:黑豆皮花青素对酪氨酸酶单酚酶的最佳作用条件为黑豆皮花青素浓度0.6mg·mL-1、L-酪氨酸浓度6 mmol·L-1、温度37℃、时间15 min,此时抑制率高达50.37％;对二酚酶的最佳作用条件为黑豆皮花青素浓度0.8mg·mL-1、L-多巴浓度6mmol·L-1、温度35℃、时间10 min,此时抑制率52.45％.与VC相比,黑豆皮花青素对酪氨酸酶单、二酚酶的抑制作用更强.动力学试验表明,黑豆皮花青素对酪氨酸酶单、二酚酶活性有抑制作用,IC50分别为1.03和0.82 mg·mL-1,对酪氨酸酶有可逆的混合型抑制作用,其抑制常数Ki为0.61 mg·mL-1.紫外光谱分析表明,黑豆皮花青素使酪氨酸酶发生蓝移,表明此酶构象改变.荧光光谱分析表明,黑豆皮花青素对酪氨酸酶有静态猝灭作用,298,303和308 K时其结合位点数分别为0.76,0.71和0.65,结合常数KA分别为159.66,94.23和54.89 L·mol-1.研究结果说明黑豆皮花青素可以有效抑制酪氨酸酶活性,是天然植物来源的酪氨酸酶抑制剂.
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1基本情况rn蒙城枢纽是涡河上一座集防洪、排涝、蓄水灌溉、交通航运于一体的大型枢纽工程,由节制闸、分洪闸、船闸三座建筑物组成.蒙城枢纽是涡河上最后一道节制闸,控制流域面积15475km2,设计蓄水灌溉面积30万亩.老蒙城枢纽节制闸建成于1960年5月,分洪闸建成于1972年6月,船闸建成于1971年8月,涡河蒙城枢纽总体已运行60年.
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