【摘 要】
：
目的 对超滤法透析Y群脑膜炎奈瑟菌(简称脑膜炎球菌)荚膜多糖的方法进行优化.方法 分别用恒压恒体积和恒泵速恒体积法、以0.5 mol/L氯化钙溶液和注射用水为透析液超滤Y群脑膜炎球菌荚膜多糖苯酚抽提上清液,耗用透析液体积5倍于料液体积时停止超滤,超滤结束后,向氯化钙超滤样品中直接加入乙醇沉淀多糖,向注射用水超滤样品中加入氯化钙溶液后再加入乙醇沉淀多糖.比较各种超滤方法透析过程中的膜包水通量、透析耗用时间和超滤器进口压力的变化.比较各种超滤方法所获多糖的收获量、唾液酸和O-乙酰基含量以及蛋白质、核酸、内毒素
【机 构】
：
兰州生物制品研究所有限责任公司第一研究室 甘肃省疫苗工程技术研究中心,甘肃 兰州730046
论文部分内容阅读
目的 对超滤法透析Y群脑膜炎奈瑟菌(简称脑膜炎球菌)荚膜多糖的方法进行优化.方法 分别用恒压恒体积和恒泵速恒体积法、以0.5 mol/L氯化钙溶液和注射用水为透析液超滤Y群脑膜炎球菌荚膜多糖苯酚抽提上清液,耗用透析液体积5倍于料液体积时停止超滤,超滤结束后,向氯化钙超滤样品中直接加入乙醇沉淀多糖,向注射用水超滤样品中加入氯化钙溶液后再加入乙醇沉淀多糖.比较各种超滤方法透析过程中的膜包水通量、透析耗用时间和超滤器进口压力的变化.比较各种超滤方法所获多糖的收获量、唾液酸和O-乙酰基含量以及蛋白质、核酸、内毒素和苯酚残留量.结果 在恒压恒体积模式超滤中,用0.5 mol/L氯化钙溶液超滤膜包水通量逐步降低,7 min后维持在421 mL/(m2·min);用注射用水超滤时,膜包水通量逐步升高,7 min后维持在725 mL/(m2·min);完成5倍体积透析液透析后,0.5 mol/L氯化钙透析耗时20 min,注射用水透析耗时13 min.在恒泵速恒体积模式超滤中,用0.5 mol/L氯化钙超滤时,超滤器进口压力逐步升高,11 min后维持在0.59 bar(注:1 bar=105 Pa);用注射用水超滤时,超滤器进口压力逐渐降低,9 min后维持在0.22 bar;各种超滤方法对精制多糖的收量、生化指标、内毒素和苯酚残留量均无影响.结论 先用注射用水恒压恒体积模式超滤,然后再加入氯化钙的方法能有效缩短超滤时间,减少氯化钙用量,且不影响各种生化指标.
其他文献
目的 采用人胚肺二倍体细胞(2BS细胞)培养,结合实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测,开展甲型肝炎病毒(HAV)在2BS细胞核酸增殖培养模型的建立研究.方法 将不同浓度的HAV活病毒感染2BS细胞,分别于感染后0、8、10、14、20 d收获HAV感染的细胞,应用已建立的HAV核酸检测和抗原检测方法分别检测HAV病毒核酸含量和抗原含量的动态变化.结果 HAV在2BS细胞中可有效复制和扩增,高剂量组以1×104 CCID50/mL HAV感染0d即可检测到HAV核酸,10～20 d病毒核酸达到峰
在动物受精过程中,卵母细胞皮层颗粒所分泌的蛋白酶在防止多精入卵中起着重要作用。在有花植物的有性生殖过程中,受精过程则更为复杂。这一过程涉及到花粉管所运输的一对不可移动的精子分别与卵细胞和中央细胞融合的过程。在通常情况下,每个胚珠只会吸引一根花粉管,从而有效地降低多精入卵可能性。植物受精后防止多余花粉管进入胚囊的机制长期以来一直不清楚。武汉大学植物生殖研究团队最近的一项工作发现卵细胞本身在防止多花粉
目的 筛选与自身免疫病相关兼职蛋白的B细胞优势表位肽并进行血清学检定.方法 利用DNAMAN软件分析不同物种热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)和α-烯醇酶氨基酸序列同源性,IEDB数据库和瓜氨酸化在线平台预测线性B细胞表位和瓜氨酸化修饰位点;间接ELISA检测抗HSP70和α-烯醇酶蛋白瓜氨酸化前后表位肽抗体.结果 同源性分析和IEDB数据库预测得到兼职蛋白HSP70和α-烯醇酶各10个B细胞优势表位肽;瓜氨酸化位点预测显示,其分别有9个和4个位点可能会发生瓜氨酸化修
流行性乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)为蚊媒传播的黄病毒家族成员之一,是流行性乙型脑炎(简称乙脑)的病原体,其遍布整个东南亚和南亚地区,且感染后会引起严重神经系统症状,因而对人类生命健康造成巨大威胁.JEV吸附与进入宿主细胞是其感染靶细胞的关键步骤,参与这一过程的分子主要是JEV表面的包膜蛋白以及宿主细胞表面的10余种黏附分子或病毒受体,包括被多种病毒使用的细胞表面分子、热休克蛋白以及特异性结合病毒的分子.明确参与JEV吸附与进入宿主细胞的分子,不仅能为阐明J
抗体依赖增强(antibody-dependent enhancement,ADE)是关系到病毒疫苗和抗体疗法安全性的重要问题之一.临床试验表明,ADE效应是导致部分病毒疫苗(如登革热疫苗等)研发失败的重要原因.针对非典型肺炎的致病病毒严重急性呼吸综合征冠状病毒(severe acute respiratory syndrome-coronavirus,SARS-CoV)以及其他呼吸道病毒的研究提示,这些病毒刺激产生的抗体可能会通过ADE效应加重疾病症状.基于以上证据,新型冠状病毒SARS-CoV-2的A
The continued evolution of SARS-CoV-2 has raised questions regarding the ability of prior immunity to early pandemic strains to afford protection against emerging variants.In a recent study,Stamatatos et al.demonstrate that currently approved mRNA vaccine
采用密度泛函理论的第一性原理方法研究了扶手椅型g-C3N4纳米带(AC-g-C3N4NRs)和锯齿型g-C3N4纳米带(ZZ-g-C3N4NRs)的电子结构和光学性质.结果 表明:AC-g-C3N4NRs和ZZ-g-C3N4NRs的边缘H原子均能稳定存在.AC-g-C3N4NRs的价带顶主要由多数N原子贡献,而ZZ-g-C3N4NRs的价带顶主要由CH边缘附近的N原子贡献.AC-g-C3N4NRs的导带底主要属于纳米带一侧边缘或两侧边缘附近的C原子和N原子,而ZZ-g-C3N4NRs导带底主要属于ZZ-g
二分裂是细菌繁殖的重要方式,细菌细胞膜各层于时空上协调内陷在细菌二分裂过程中发挥着关键作用.细菌细胞质膜层和肽聚糖层的内陷由细菌分裂体来驱动;而革兰阴性菌(Gram-negative bacteria,简称G-菌)外膜的内陷则是通过与肽聚糖层连接的外膜脂蛋白而被动牵拉形成.质子动力偶联的Tol-Pal系统,不仅在G-菌外膜稳定性中发挥作用,而且在细菌细胞分裂中也发挥着关键性的作用.Tol-Pal系统构成了G-菌中分裂装置的动态复合体,G-菌分裂收缩时,在质子动力的驱动下Tol-Pal复合体促使肽聚糖相关脂
目的 探讨重组11 kDa蛋白(简称11 kDa)对结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb,简称结核菌)感染豚鼠皮试反应的动态变化和意义.方法 在攻毒Mtb H37Rv后将豚鼠分为治疗组和对照组.治疗组为潜伏感染的复发模型,在攻毒后2周开始抗生素治疗,结束后再注射地塞米松诱导结核复发.对照组为自然感染模型,所有动物不予药物干预.在攻毒后第2、3、4、6、10、14、22周,每组取若干豚鼠进行11 kDa和结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein deriv
目的 对2015—2019年河南省急性弛缓性麻痹(acute flaccid paralysis,AFP)病例中,在转人类脊髓灰质炎病毒受体小鼠肺细胞(mouse cell line expressing the gene for human cellular receptor for poliovirus,L20B)增殖的非脊髓灰质炎肠道病毒基因定型和序列特征分析.方法 利用VP4-VP2编码区引物EVP4和OL68-1进行肠道病毒鉴定,均为柯萨奇A组病毒(coxsackievirus A,CV-A),