人TIMP-1 cDNA克隆、真核表达载体构建及在COS-7细胞中的表达

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jtyz888

【摘要】

：

根据ＧｅｎＢａｎｋ中ＴＩＭＰ－１基因的碱基序列，用ＲＴ－ＰＣＲ方法从人的正常肾组织中克隆出包含信号肽在内的ＴＩＭＰ－１全长ｃＤＮＡ序列。采用Ｔ－Ａ克隆的方法将之插入ｐＣＲ＾Ｒ２．１中间载体，ＤＮＡ测序证实该片段序列与文献报告的完全一致。利用亚克隆的方

【作者】

：

林洪丽陈香美

【机构】

：

中国人民解放军总医院肾内科

【出处】

：

中国生物化学与分子生物学报

【发表日期】

：

2000年3期

【关键词】

：

TIMP-1 基因克隆基因表达糖蛋白细胞增殖

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根据ＧｅｎＢａｎｋ中ＴＩＭＰ－１基因的碱基序列，用ＲＴ－ＰＣＲ方法从人的正常肾组织中克隆出包含信号肽在内的ＴＩＭＰ－１全长ｃＤＮＡ序列。采用Ｔ－Ａ克隆的方法将之插入ｐＣＲ＾Ｒ２．１中间载体，ＤＮＡ测序证实该片段序列与文献报告的完全一致。利用亚克隆的方法将ＴＩＭＰ－１ｃＤＮＡ片段克隆到ｐｃＤＮＡ３载体上，构建出ｐｃＤＮＡ／３ｔｉｍｐ－１的真核表达载体，通过脂质体ＤＯＴＡＴＰ转染至ＣＯＳ－７细胞，Ｎｏ

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