成骨细胞源性外泌体的分离提取和鉴定

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目的分离成骨细胞来源的外泌体,并对其进行鉴定。方法体外培养成骨细胞,用差速离心法分离、提取成骨细胞分泌的外泌体,经透射电子显微镜观察其形态及大小,采用蛋白质印迹法(WB)检测外泌体跨膜蛋白CD9和成骨细胞特异性碱性磷酸酶(AKP)的表达。结果成骨细胞源性外泌体为直径30~100 nm的圆形或椭圆形结构,高表达CD9和AKP蛋白。结论差速离心法提取的成骨细胞源性外泌体,具有外泌体的一般特性,并高表达成骨细胞特异性蛋白AKP。
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