【摘 要】
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采用带有环氧基的聚丙烯酸酯基质微球实现了胰蛋白酶的固定化,并制备了填充式微酶反应器。以细胞色素C为底物,考察了微酶反应器的性能。与自由溶液酶解相比,细胞色素C在微酶
【机 构】
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中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心; 中国科学院研究生院; 中国科学院;
【基金项目】
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国家自然科学基金重点项目(20435020);国家支撑计划项目(2006BAK03A00)资助
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采用带有环氧基的聚丙烯酸酯基质微球实现了胰蛋白酶的固定化,并制备了填充式微酶反应器。以细胞色素C为底物,考察了微酶反应器的性能。与自由溶液酶解相比,细胞色素C在微酶反应器上的酶解时间可以缩短到18s以内,速度是自由溶液酶解的2400倍。在此基础上,构建了在线微酶反应器-微柱液相色谱-电喷雾质谱联用平台,并采用4种标准蛋白混合物进行了评价。结果表明,4种蛋白均得到了较好的酶解和鉴定结果。此外,该平台还被应用于鼠肝提取蛋白的分析,共鉴定出138种蛋白,其中匹配两个或两个以上肽段的蛋白质有31个。
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