运用正交设计联用星点设计-响应面法优化细粒棘球蚴绦虫单克隆抗体制备中小鼠免疫方案

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目的

对制备细粒棘球蚴绦虫单克隆抗体小鼠免疫方案进行优化。

方法

应用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)抗血清效价,以抗血清效价与阴性血清OD值比值为指标,采用正交实验考察加入青链霉素的剂量、小鼠繁殖代数、免疫注射方式对免疫后抗血清效价的影响;再采用星点设计-响应面法(BBD-RSM)考察抗原用量、小鼠日龄、首免与二免间隔周期对免疫后抗血清效价的影响。

结果

正交设计确定了最佳的免疫方案为青链酶素剂量0 IU:免疫注射方式为皮下,小鼠繁殖传代次数是≤5代;BBD-RSM确定最佳免疫组合方案为抗原量60 μg;小鼠日龄42日;首免与二免间隔周期15日。

结论

实验优化了细粒棘球蚴绦虫制备单克隆抗体的小鼠免疫方案,可应用于抗原免疫方案筛选。

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