增强型绿色荧光蛋白转染活细胞效率的研究

来源 :组织工程与重建外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jaczolo
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目的研究影响增强型绿色荧光蛋白(EGFP)逆转录病毒表达系统转染活细胞效率的主要相关参数,建立一种稳定高效的活细胞EGFP标记技术。方法培养、扩增携带EGFP逆转录病毒载体的包装细胞PG13,分别于12h、24h、36h和48h收集病毒液.转染骨髓基质细胞(BMSCs),通过流式细胞仪和荧光显微镜检测不同时间点病毒转染效率。选择转染率最高时间点的病毒液,连续转染BMSCs两次,小剂量嘌呤霉素筛选6h,观察病毒转染率及细胞活力。再以上述方法转染脂肪基质细胞(ADSCs)和成纤维细胞(FBs),观察这种方法标
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