胰岛素对谷胱甘肽过氧化物酶表达的影响及其意义

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目的 探讨胰岛素对谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)表达的影响及其意义。方法 用鸡尾酒法诱导3T3-L1前脂肪细胞分化,油红O染色鉴定其分化程度;3T3-L1脂肪细胞用500 nmol/L胰岛素处理1 h后用实时荧光定量PCR方法检测GSH-Px1、GSH-Px4和GSH-Px7 mRNA表达水平;3T3-L1脂肪细胞用GSH-Px抑制剂Mercaptosuccinate (MS,10、20 mmol/L)预处理30 min后加或不加500 nmol/L胰岛素刺激4 h,用Western blot法检测葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)蛋白表达水平。结果 3T3-L1前脂肪细胞呈长梭形;诱导分化后第5天可见细胞逐渐变为球型,胞内可见细小脂滴;诱导分化后第8天可见细胞进一步变为球形且胞内脂滴明显增多。胰岛素组GSH-Px1、GSH-Px4、GSH-Px7 mRNA相对表达量低于对照组,差异有统计学意义(P <0.05);存在或不存在胰岛素条件下,10 mmol/L MS处理组与MS未处理组GLUT4蛋白表达比较,差异无统计学意义(P> 0.05);20 mmol/L MS处理组GLUT4蛋白表达低于MS未处理组,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 长时间胰岛素刺激抑制GSH-Px mRNA的表达,用MS抑制GSH-Px活性负性调控GLUT4蛋白表达。
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