葫芦素BE聚乳酸纳米微粒对肺癌细胞自噬及其生物学行为的作用研究

来源 :中国临床药理学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xtmyddddd
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目的 研究以葫芦素BE聚乳酸纳米微粒为载体,lncRNA靶向调控苄氯素1重组蛋白(BECN1)对肺癌细胞自噬及其生物学行为的作用。方法 对肺癌细胞A549进行培养,将肺癌细胞A549分为对照组(Control组)与实验组,实验组为不同浓度的葫芦素BE聚乳酸纳米微粒组(0.01μg·mL-1组、0.10μg·mL-1组、1.00μg·mL-1组、10.00μg·mL-1组及20.00μg·mL-1组),CuBE-PLA-NP+si-NC组和CuBE-PLA-NP+si-BECN1组。通过噻唑蓝(MTT)法检测A549细胞抑制率以及活力;用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测BECN1 mRNA表达水平;用蛋白质印迹法检测BECN1蛋白表达水平及BECN1对A549细胞自噬及凋亡相关蛋白的影响;用流式细胞术检测调控BECN1对A549细胞凋亡的影响。结果 Control组、CuBE-PLA-NP组、CuBE-PLA-NP+si-NC、CuBE-PLA-NP+si-BECN1组细胞活力分别为(100.00±4.94)%,(45.22±3.79)%,(44.85±4.93)%,(85.59±5.62)%,Control组与CuBE-PLA-NP组相比,CuBE-PLA-NP+si-NC组与CuBE-PLA-NP+si-BECN1组相比,差异有统计学意义(P<0.05);随着CuBE-PLA-NP浓度的增加,BECN1 mRNA表达上调,20.00μg·mL-1组A549中BECN1 mRNA水平(2.59±0.30)及BECN1蛋白水平(1.26±0.06)升高最明显,且呈现剂量依赖;CuBE-PLA-NP可促进A549细胞自噬,而敲低BECN1可逆转CuBE-PLA-NP对A549细胞自噬的影响;CuBE-PLA-NP可通过调控BECN1的表达诱导A549细胞凋亡。结论 以葫芦素BE聚乳酸纳米微粒为载体,lncRNA靶向调控BECN1能够促进肺癌细胞发生自噬,促进其凋亡。
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