【摘 要】
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目的:本研究旨在探究附子理中汤对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）大鼠的治疗作用及其对调节性T细胞（T Regulatory cells,Treg）相关因子的作用,从而探讨附子理中汤治疗脾肾阳虚型UC的可能机制,为临床治疗UC提供实验依据。方法:60只清洁级大鼠适应性喂养一周后,随机分为空白组（10只）和造模组（50只）。空白组给予等量生理盐水,造模组先采用15%
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目的:本研究旨在探究附子理中汤对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）大鼠的治疗作用及其对调节性T细胞（T Regulatory cells,Treg）相关因子的作用,从而探讨附子理中汤治疗脾肾阳虚型UC的可能机制,为临床治疗UC提供实验依据。方法:60只清洁级大鼠适应性喂养一周后,随机分为空白组（10只）和造模组（50只）。空白组给予等量生理盐水,造模组先采用15%番泻叶2ml/100g联合氢化可的松10mg/kg复制脾肾阳虚模型,连续造模14天。再用TNBS/乙醇灌肠法复制UC模型。随机抽取造模组大鼠5只,送病理检查证明造模成功。将造模成功的大鼠随机平均分配为模型组、西药组、附子理中汤高、中、低剂量组。造模3天后,开始灌胃治疗,西药组给予0.32g/kg·d的柳氮磺胺吡啶悬浮液,附子理中汤高、中、低剂量组分别按3.37、6.75、13.50g/kg·d的剂量灌胃治疗。空白组和模型组给予10ml/kg的生理盐水灌胃,连续给药14天。实验期间密切观察并记录大鼠一般情况、大便情况、体重,评估疾病活动指数（disease activity index,DAI）。末次给药后,对大鼠禁食不禁水24h,对大鼠进行麻醉,剖腹,采集腹主动脉血液5ml,用Elisa法测定大鼠血清中TGF-β1、IL-10的含量。剪取距大鼠肛门10cm的结肠组织,选取一部分结肠组织放入4%多聚甲醛溶液中固定,用于制备病理切片,经HE染色后在光镜下观察各组组织病理形态;将剩余结肠组织剪碎置于-80℃冰箱中保存,采用免疫蛋白印迹法（Western Blot,WB）检测大鼠结肠组织中Foxp3、STAT5的表达量。结果:（1）大鼠一般情况及DAI评分:与空白组相比,造模各组大鼠DAI评分明显升高,差异有显著统计学意义（P<0.01）;经治疗后,与模型组相比,各治疗组DAI评分均有不同程度的降低,差异有统计学意义（P<0.05）,以附子理中汤高剂量组差异最为明显。（2）大鼠结肠HE染色结果:空白组结肠黏膜完好,隐窝结构清楚,无水肿及炎性浸润。模型组结肠黏膜糜烂,渗出充血,大量炎性细胞浸润,隐窝结构破坏或改变,腺体排列紊乱。各治疗组结肠黏膜与模型组相比有不同程度的改善,各层结构基本完好,隐窝结构基本完整,但隐窝表面排列紊乱,数量减少,隐窝有不同程度的萎缩及变形。（3）大鼠血清Elisa结果:与空白组相比,模型组大鼠血清中IL-10,TGF-β1明显降低,差异有显著统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,各治疗组大鼠血清中IL-10、TGF-β1均有不同程度的升高,差异有统计学意义（P<0.05）,各治疗之间比较差异无统计学意义（P>0.05）。（4）大鼠结肠组织WB结果:与空白组相比,模型组大鼠结肠组织中Foxp3、STAT5表达明显降低,差异有显著统计学意义（P<0.01）;与模型组相比,各治疗组大鼠结肠组织Foxp3、STAT5均有不同程度的升高,差异有统计学意义（P<0.05）。各治疗组结肠组织STAT5表达量差异无统计学意义（P>0.05）。附低组、附中组与附高组Foxp3表达量差异有显著统计学意义（P<0.01）。结论:（1）采用15%番泻叶联合氢化可的松可复制脾肾阳虚模型,采用TNBS/乙醇法可诱导UC模型。（2）附子理中汤可改善脾肾阳虚型UC大鼠症状,并能改善大鼠结肠组织炎症,并能修复损伤的结肠黏膜。（3）附子理中汤可上调Treg相关因子IL-10、TGF-β1、Foxp3、STAT5的水平发挥治疗脾肾阳虚型UC的作用。
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