【摘 要】
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目的:利用相对和绝对同位素标记(iTRAQ)和纳升级两维高效液相色谱-电喷雾-OrbiTrap质谱(2D nanoHPLC-ESI-OrbiTrap MS/MS)蛋白组学方法探寻卵巢癌血清标记物,以提高早期卵巢
【机 构】
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新疆医科大学附属肿瘤医院妇科,新疆医科大学公共卫生学院
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目的:利用相对和绝对同位素标记(iTRAQ)和纳升级两维高效液相色谱-电喷雾-OrbiTrap质谱(2D nanoHPLC-ESI-OrbiTrap MS/MS)蛋白组学方法探寻卵巢癌血清标记物,以提高早期卵巢癌诊断率。方法:收集卵巢癌患者血清20例(卵巢癌组),CA125异常的卵巢良性囊肿16例(良性囊肿组),健康者20例(正常对照组),每组取10例组内等量混合后去除高丰度蛋白,iTRAQ试剂标记,进行强离子交换柱分离多肽、nanoLC分离并在线连接电喷雾串联OrbiTrap质谱分析,筛选出重要的差异蛋白。随后采用Western blot方法,将筛选出的重要差异蛋白进行56例临床血清样本逐例验证。结果:共鉴定出差异蛋白326个。其中重点筛选出了8个重要的差异蛋白:蛋白PARD3、SRP1-alpha、LAMA4、LRP16、IgSF2、NRAMP1、NF-E2-related factor 1和APOA4;验证了3个重要差异蛋白:PARD3、NRAMP1、APOA4。结论:应用iTRAQ标记的定量蛋白质组学技术筛选出了8个重要的差异蛋白,可能是潜在的肿瘤标记物。其中APOA4蛋白有可能成为区分恶性与良性卵巢疾病的生物标志物。
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