【摘 要】
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目的 采用网络药理学、分子对接及生物分子实验共同探讨柚皮素抑制人骨肉瘤（OS）细胞SJSA-1细胞增殖及周期的机制作用。方法 通过CCK-8法确定柚皮素对SJSA-1细胞增殖的抑制作用，检索TCMSP和SwissTargetPredictation数据库获得柚皮素潜在靶点；通过GeneCards、OMIM和TTD数据库筛选骨肉瘤靶点，将柚皮素与OS作用的交集潜在靶点导入STRING绘制PPI网络。
【基金项目】
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国家自然科学基金（81573304）；
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目的 采用网络药理学、分子对接及生物分子实验共同探讨柚皮素抑制人骨肉瘤（OS）细胞SJSA-1细胞增殖及周期的机制作用。方法 通过CCK-8法确定柚皮素对SJSA-1细胞增殖的抑制作用，检索TCMSP和SwissTargetPredictation数据库获得柚皮素潜在靶点；通过GeneCards、OMIM和TTD数据库筛选骨肉瘤靶点，将柚皮素与OS作用的交集潜在靶点导入STRING绘制PPI网络。对交集靶蛋白进行GO功能富集分析和KEGG通路分析；对鼠双微体基因2（murine double minute 2,MDM2）靶点使用Schr9dinger软件进行分子对接。用Western blot法测定p53、MDM2及p21蛋白表达，并用流式细胞法分析细胞周期变化。结果 共筛选出102个柚皮素潜在靶点与260个骨肉瘤靶点，GO富集分析和KEGG对12个交集潜在靶点进行更深入分析。对接结果显示柚皮素能够较好地和MDM2结合并与MDM2蛋白分子氨基酸残基产生多种作用力。生物实验结果显示柚皮素在SJSA-1细胞中IC50为18.3μmol/L并诱使细胞周期G2期发生阻滞。结论 基于网络药理学、分子对接及细胞生物实验，表明柚皮素通过p53-MDM2信号通路抑制人骨肉瘤细胞SJSA-1增殖和诱导细胞G2期阻滞。
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