shRNA敲低ILK后对人脑胶质瘤细胞U251增殖、迁移及侵袭的影响

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目的:观察应用sh RNA敲低人脑胶质瘤U251细胞系ILK基因表达后,对其在增殖、迁移、侵袭的影响。方法:将特异性的sh RNA表达载体质粒ILK-PGFP-V-RS转染人脑胶质瘤细胞系U251(U251-ILK),同时构建空质粒组(U251-NC)稳定转染细胞株。运用RT-PCR及蛋白质免疫印迹(Western blot)测定各组细胞株的ILK、cyclin D1、E-cadherin、Snail m RNA及其蛋白表达水平,应用Transwell及预铺Matrigel的小室检测转染后相应细胞株的迁移和侵袭能力,同时使用CCK8法检测细胞株增殖能力。结果:顺利构建成具有稳定敲低ILK表达水平的U251-si细胞株。U251-si细胞已证实ILK无论在m RNA水平还是其蛋白质水平均较U251组、U251-N显著降低(P<0.05)。结论:应用sh RNA敲低胶质瘤细胞系U251中ILK基因后,抑制了胶质瘤细胞的增殖迁移及侵袭能力,为临床治疗提供新的作用靶点。
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