青藏高原横断山区饲用黄芪根瘤菌的抗逆性及系统发育分析

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分离纯化青藏高原横断山区(四川甘孜藏族自治州和阿坝藏族羌族自治州)原生野生饲用黄芪根瘤菌,为优良菌株的筛选提供种质资源.采用纯培养法从该地区部分饲用黄芪植物根瘤中分离纯化根瘤菌;通过16SrDNA序列同源性分析确定菌株的系统发育地位;通过测定菌株的耐盐性、初始pH生长范围及生长温度范围来分析饲用黄芪根瘤菌的抗逆性.从青藏高原横断山区7个县15个采样点获得10种饲用黄芪植物的根瘤,共分离纯化出36个根瘤菌菌株.16SrDNA序列同源性系统发育分析表明,36个菌株分别为根瘤菌属-土壤杆菌属(RRhizobium-Agrobacterium)30株、苍白杆菌属(Ochrobactrum)5株、中慢生根瘤菌属(Mesorhizobium)1株,共3个群.生理性状测定试验表明,36个根瘤菌菌株中20株能在4~45℃的恒温条件下生长,15株能在4~50℃的恒温条件下生长,仅供试菌株SCAU509的最高耐受温度不能超过37℃,所有菌株能在经过60℃处理10 min后置28℃恒温条件下生长;除SCAU495只能在pH 6~8的培养基上生长,SCAU509只能在pH 5~8的范围内正常生长外,其余34株均能在pH 4~10的培养基上生长;SCAU509只能在1%NaCl以下的YMA培养基上生长外,其余供试菌株中最高能耐受1%、2%、3%、4%、5%、6%NaCl的数量分别为2、7、6、10、8和2株.本研究表明,青藏高原横断山区(四川甘孜藏族自治州和阿坝藏族羌族自治州)饲用黄芪根瘤菌中多数菌株对高盐、高温、低温及过酸过碱环境均具有较强的耐受能力.
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