小鼠IL—18 cDNA克隆及在H22肝癌细胞中的初步表达

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【摘要】

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目的构建小鼠白细胞介素-18(mIL-18)逆转录病毒载体,实现mIL-18在小鼠H22肝癌细胞中表达.方法用RT-PCR方法从小鼠肝脏细胞中扩增出mIL-18 cDNA,克隆到载体pBluscript中,测序

【作者】

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周虎陆梁裴冬生赵惠仁

【机构】

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徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心

【出处】

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免疫学杂志

【发表日期】

：

2002年3期

【关键词】

：

白细胞介素-18 逆转录病毒载体克隆 CDNA 肝癌癌细胞动物实验 interleukin-18 retroviral vector cloning

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目的构建小鼠白细胞介素-18(mIL-18)逆转录病毒载体,实现mIL-18在小鼠H22肝癌细胞中表达.方法用RT-PCR方法从小鼠肝脏细胞中扩增出mIL-18 cDNA,克隆到载体pBluscript中,测序后亚克隆到逆转录病毒载体pLNCX中.pLNCX/mIL-18重组子用脂质体介导的方法转染PA317包装细胞,用400μg/mL G418进行筛选.挑取筛选得到的阳性克隆扩大培养,取上清感染NIH3T3细胞和H22肝癌细胞.用感染后的H22细胞上清诱导小鼠脾细胞IFN-γ生成能力来检测H22细胞分泌

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