氯霉素乙酰基转移酶融合蛋白表达、纯化和鉴定

来源 :免疫学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：victor530505911

【摘要】

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目的对氯霉素乙酰基转移酶(Chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因进行表达和纯化.方法通过PCR扩增编码CAT氨基酸序列的基因片断,并将之克隆入pGEX-2T载体.IPTG诱导蛋

【作者】

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潘玉先瘳志勇郝卫车小燕

【出处】

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免疫学杂志

【发表日期】

：

2004年z1期

【关键词】

：

氯霉素乙酰基转移酶融合蛋白表达纯化鉴定 <Keyword>loramphenicol acetyltransferase Fusion p

【基金项目】

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广东省自然科学基金重点资助项目(020100),广东省自然科学基金资助项目(010637)

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目的对氯霉素乙酰基转移酶(Chloramphenicol acetyltransferase,CAT)基因进行表达和纯化.方法通过PCR扩增编码CAT氨基酸序列的基因片断,并将之克隆入pGEX-2T载体.IPTG诱导蛋白融合表达,产物经琼脂糖亲和层析树脂纯化.免疫印迹鉴定纯化蛋白的抗原性.结果筛选得到的重组子诱导后表达相对分子质量约为52 600的CAT融合蛋白.树脂纯化及酶切后均得到高纯度的蛋白样品.纯化蛋白能与抗CAT抗体特异结合.结论本研究获得了CAT基因的融合表达蛋白,并对其完成纯化,为制备抗血清

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