重组人血小板生成素在大肠杆菌中表达的研究

来源 :中国生物化学与分子生物学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gzalpha
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采用化学法全合成了编码人血小板生成素(thrombopoietin,TPO)成熟肽N端153氨基酸的基因序列,构建基于该合成基因的表达质粒,结果以谷胱甘肽转硫酶-TPO153(GST-TPO153)融合蛋白的方式获得了占全菌蛋白40%的高效表达.进一步采用PCR方法分别对TPO合成基因及TPOcDNA的翻译起始区(TIR)序列进行定点突变,以降低这一区域的G-C含量.将突变序列分别插入到pBV220表达载体中,重组质粒在转化大肠杆菌JM109后,均获得了表达,其中TIR区突变后的合成基因表达产物约占全菌蛋
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