目的:研究建立桂枝水提液的高效液相色谱双波长融合指纹图谱分析方法,并测定桂枝水提液中原儿茶酸、原儿茶醛、香豆素、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛的含量,为桂枝水提液质量控制提供依据。方法:采用Waters Symmetry RP C18色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱(0~10 min,3%A→6%A;10~20 min,6%A→10%A;20~35 min,10%A→18%A;35~50 min,18%A→25%A;50~80 min,25%A→30%A;80~90 min,30%A→40%A),流速1.0 mL·min-1,检测波长254、275 nm,柱温30℃。使用Matlab 7.1软件编程,对波长254、275 nm下的CSV格式数据进行全时段双波长融合。结果:原儿茶酸、原儿茶醛、香豆素、肉桂醇、肉桂酸、桂皮醛线性范围分别为0.37~14.9、0.05~2.05、0.58~23.37、0.39~15.66、0.67~26.85、2.48~99.23μg·mL-1,r为0.9995以上;平均回收率在97.8%~102%,RSD均小于3%(n=6)。双波长融合指纹图谱全面体现了桂枝254 nm、275 nm特征吸收波长的指纹信息,以桂皮醛为参照峰,标定了12个共有峰,指认其中6个峰,分析20批不同产地及批次的桂枝与共有模式之间具有良好的相似性,相似度均在0.90以上。融合后的指纹图谱信息更加丰富,6个物质在20批药材中含量有一定的差异。结论:双波长融合技术的高效液相色谱指纹图谱及6个成分的含量测定可以用于桂枝水提物的质量控制。