【摘 要】
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为提高天冬氨酸的转化效率,对大肠杆菌发酵产酶条件和发酵转化液的酶促反应条件进行了优化,结果表明,在大肠杆菌在10 L发酵罐上溶氧维持在25%,发酵周期为8 h,发酵3 h时添加0.
【基金项目】
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山东省农业重大应用技术创新课题(鲁财指2014-38);城新创新基金(cxcj-06)
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为提高天冬氨酸的转化效率,对大肠杆菌发酵产酶条件和发酵转化液的酶促反应条件进行了优化,结果表明,在大肠杆菌在10 L发酵罐上溶氧维持在25%,发酵周期为8 h,发酵3 h时添加0.2%的吐温-60的条件下,天冬氨酸酶产率最高。大肠杆菌所产天冬氨酸酶为胞内酶,因此,采用表面活性剂、有机溶剂及超声波破碎法对大肠杆菌的细胞膜透性进行处理,结果表明:反应结束后发酵转化液用0.5%的甲苯处理1 h后进行底物转化,转化效果最好。在此条件下优化了酶促反应温度和pH,结果表明:温度为45℃,pH为8.5时,发酵转化液对底物的转化效果最佳。在上述条件下,10 mL发酵转化液转化90 mL质量浓度为200 g/L的富马酸底物时,转化周期在6 h以内,底物转化效率大于99%。
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