【摘 要】
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目的 探讨用RNA干扰技术沉默人胃癌细胞株MGC-803细胞中钙结合蛋白S100A4的基因,对PI3K/AKT/mTOR信号通路及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响及与胃癌血管生成的关系.方法 采用RNA干扰技术将针对S100A4和非特异性阴性对照序列的siRNA分别转染至人胃癌MGC-803细胞,利用Real-time RT-PCR和Western blot检测S100A4基因和蛋白的表达,筛选S100A4基因沉默组和阴性对照组细
【机 构】
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中国医科大学附属盛京医院胃肠营养外科,辽宁沈阳,110004;中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室,辽宁沈阳,110122
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目的 探讨用RNA干扰技术沉默人胃癌细胞株MGC-803细胞中钙结合蛋白S100A4的基因,对PI3K/AKT/mTOR信号通路及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响及与胃癌血管生成的关系.方法 采用RNA干扰技术将针对S100A4和非特异性阴性对照序列的siRNA分别转染至人胃癌MGC-803细胞,利用Real-time RT-PCR和Western blot检测S100A4基因和蛋白的表达,筛选S100A4基因沉默组和阴性对照组细胞.采用Western blot方法检测Akt、mTOR磷酸化水平和VEGF蛋白表达情况.结果 成功建立S100A4基因沉默的人胃癌MGC-803细胞.S100A4基因沉默的MGC-803细胞中Akt、mTOR磷酸化水平明显降低,同时VEGF蛋白表达亦显著降低.结论 S100A4能通过PI3K/AKT/mTOR信号通路上调VEGF表达,进而促进胃癌血管生成.
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