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摘要：该文结合基层防疫工作实践，介绍一项因现场无法确诊而需要采集病料送权威机构进行微生物学、血清学、病理学检测而开展的样品采集、保存、送检技术，指导基层更好地开展畜禽防疫卫生监督工作。
关键词：疑似病（死）畜禽动物;样品采集;保存;送检
中图分类号：S851.34
文献标识码：B
doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.15.009
作者简介：谭菊（1969-），女，大专，高级兽医师，从事动物卫生监督工作。
0引言
在日常工作中，检疫人员会遇到疑似患病动物死亡或者染病的动物产品，为明确病因，更好地开展工作，亦为更强有力地说服畜禽户主采取相关处理措施，需抽取病理样品送到有检测能力的权威机构进行微生物学、血清学、病理学检测，然后根据权威机构提供的检测报告进行处理。疑似病（死）畜禽动物的样品采集与保存送检是开展动物疫病监测的前提，采样方法、采样部位、采样数量和样品是否具有代表性直接决定检测结果的准确性和结论的科学性，是指导动物防疫卫生监督工作的重要环节，是基层防疫检疫人员必须掌握的一项实用技术。
1采样材料
1.1防护品
防护衣、防护手套、防护口罩、防护帽、护目镜。
1.2采样工具
采样箱、保湿箱、解剖刀、剪刀、钩、镊子、酒精灯、酒精棉、碘洒棉、注射器、棉球（棒）、玻片等。
1.3装纳样品的容器
小瓶、玻片、平皿、离心管、封口样品袋、塑料样品袋、铝盒、胶布等。
1.4采样记录用品
采样登记表、不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单。
1.5样品保存液
石碳酸溶液、灭菌生理盐水、50%灭菌甘油生理盐水、10%甲醛溶液、血液抗凝剂等。
2采样前准备
（1）采样前对畜禽进行疫病诊断。
（2）采样前确定采样对象（疑似患病动物）和采样部位以及采样量，并准备好相应材料和工具。
3采样方法
根据不同疫病或检验目的采集疑似病死畜禽动物相应的样品，分述如下。
（1）对于猪瘟（含非洲猪瘟）、猪丹毒、猪口蹄疫或猪水泡病、猪肺疫、猪流行性感冒、猪呼吸性链球菌病、猪蓝耳病、鸡新城疫等高热性病疑似死亡的畜禽可以采集病死畜禽的分泌物，如鼻液、脓性分泌液、水泡液、阴道分泌物等，采集方法：用棉棒蘸取分泌物（鼻液、脓液、水泡液、阴道分泌物等）放在消过毒的样品容器中[1]。
（2）对于炭疽和一些血液寄生虫病疑似病死的动物需采取血液样本，采样方法：用注射器在颈部静脉抽取5mL，放在样品容器内，不要摇动，或者滴1～2滴在玻片上，等干燥后固定，可以多做几张。
（3）对于被毛粗乱无光泽、过分消瘦的动物怀疑寄生虫病死亡的动物样品，采集方法：采集动物粪便，放在容器瓶里，或者用玻片做成压片[2]。
（4）对于染病的动物产品，如猪瘟（含非洲猪瘟）、猪丹毒等濒临死亡已被养殖业主宰杀后的病畜产品样，采集方法是采集实质病变脏器，如淋巴结、肾脏、心包、皮肤等，选择病变组织和正常组织相邻的部位，用剪刀剪下含正常组织和病变组织样品2、3块（每块5～10 g）放在10%甲醛溶液（病毒使用）或者消毒过的容器中（细菌）。
（5）对于皮肤疥癣的病料，采集方法是用刃口钝的刮刀使劲刮皮肤表面，然后将刮出的皮屑放到容器瓶内，加入70%酒精，密封盖紧。
（6）对于即将濒死的疑似非洲猪瘟病猪，用75%酒精擦拭患猪颈静脉处，然后用无菌注射器在病猪颈静脉抽取血液，放入盛有抗凝剂的采血小管中，数量达采血小管2/3处[3]。
（7）在样品采集时，采样人员穿戴好防护服、防护帽、护目镜，做好个人卫生防护。尽量采用无菌操作采集具有代表性的病料作样品。操作熟练麻利，不要污染样品及其他物品。及时填写样品登记表、标签、采样单，在样品上贴好标签（与登记表对应），用记号笔做好标记。如需加入保存剂或其他处理剂的，立即进行现场处理并清点采样数量（包括复检和留样备份）[4]。
4样品保存和送检
（1）样品保存。病样采好后，通常将病样放在有冰块的保温箱内保存，并立即送往权威机构检测。如果病样不能很快送到权威机构检测，那么根据需要加入适量的保存剂，根据检验项目种类进行相应处理。如需要血清检测的，不加抗凝血剂，将采集的血液在室温下静置至凝固，收集析出的血清，装于小瓶中，将小瓶盛装在铝盒内，在铝盒内加填塞物;需做细菌或病毒学检验的，每10 mL血液加1 mL抗凝血剂等。
（2）病样送检前開具委托检测书（简单说明目的要求以及病料病理变化及疑似病情说明、检测项目等信息），填制检测项目表和样品交接单，进行样品交接[5]。
5疑似病死动物及环境的处理
在病样送检后结果未出来前，拟定一份裁定协议后，对该采样病死畜禽严格作无害化处理，对环境和相关人员进行消毒。
6讨论与结论
6.1讨论
疑似病死畜禽动物的确诊，第一，加强检疫人员和养殖业主对动物疫病的业务知识培训，提高对疫病病理病状病征的认识;第二，强化基层检疫人员安全知识和操作技能培训，在与疑似病死畜禽动物接触时，一定要戴口罩和护目镜，穿防护服，做好个人卫生;第三，严格按规范的疑似病死畜禽动物病料样品采集、保存与送检。
6.2结论
规范的疑似病死畜禽动物样品的采集、保存和送检直接决定检测的准确性和结论的科学性，是基层动物防疫和动物公共卫生常见的工作手段，是解决防疫人员与养殖业主争执的重要依据，是做好基层防疫工作必须掌握的一门实用技术。特别是目前国内非洲猪瘟疫情频发，采集病样送与有资质的检测机构确诊是一项长期的常规性的工作，所以有必要加强样品采集保存送检的规范操作技术的普及。
参考文献
[1]毛家红.动物活体样品采集技术[J].农业灾害研究，2014，4（5）：47-48.
[2]王占伟，邵国青.兽医科学研究中的样品采集方法及其最新进展[J].中国畜牧兽医，2012，39（lO）：242-246
[3]高丽.做好猪（牛、羊）尿液样品采集工作[J].畜牧兽医科技信息，2016 （4）：97.
[4] 吕学梅.样品采集的生物安全与防范措施[J].中国动物检疫，2011，28（ 8）：54-55.
[5]齐旭俊.动物疫病检测中样品采集存在问题和解决方法[J].畜牧兽医杂志，2011，30 （6）：56-58.
关键词：疑似病（死）畜禽动物;样品采集;保存;送检
中图分类号：S851.34
文献标识码：B
doi： 10.3969/j.issn.2096-3637.2019.15.009
作者简介：谭菊（1969-），女，大专，高级兽医师，从事动物卫生监督工作。
0引言
在日常工作中，检疫人员会遇到疑似患病动物死亡或者染病的动物产品，为明确病因，更好地开展工作，亦为更强有力地说服畜禽户主采取相关处理措施，需抽取病理样品送到有检测能力的权威机构进行微生物学、血清学、病理学检测，然后根据权威机构提供的检测报告进行处理。疑似病（死）畜禽动物的样品采集与保存送检是开展动物疫病监测的前提，采样方法、采样部位、采样数量和样品是否具有代表性直接决定检测结果的准确性和结论的科学性，是指导动物防疫卫生监督工作的重要环节，是基层防疫检疫人员必须掌握的一项实用技术。
1采样材料
1.1防护品
防护衣、防护手套、防护口罩、防护帽、护目镜。
1.2采样工具
采样箱、保湿箱、解剖刀、剪刀、钩、镊子、酒精灯、酒精棉、碘洒棉、注射器、棉球（棒）、玻片等。
1.3装纳样品的容器
小瓶、玻片、平皿、离心管、封口样品袋、塑料样品袋、铝盒、胶布等。
1.4采样记录用品
采样登记表、不干胶标签、签字笔、记号笔、采样单。
1.5样品保存液
石碳酸溶液、灭菌生理盐水、50%灭菌甘油生理盐水、10%甲醛溶液、血液抗凝剂等。
2采样前准备
（1）采样前对畜禽进行疫病诊断。
（2）采样前确定采样对象（疑似患病动物）和采样部位以及采样量，并准备好相应材料和工具。
3采样方法
根据不同疫病或检验目的采集疑似病死畜禽动物相应的样品，分述如下。
（1）对于猪瘟（含非洲猪瘟）、猪丹毒、猪口蹄疫或猪水泡病、猪肺疫、猪流行性感冒、猪呼吸性链球菌病、猪蓝耳病、鸡新城疫等高热性病疑似死亡的畜禽可以采集病死畜禽的分泌物，如鼻液、脓性分泌液、水泡液、阴道分泌物等，采集方法：用棉棒蘸取分泌物（鼻液、脓液、水泡液、阴道分泌物等）放在消过毒的样品容器中[1]。
（2）对于炭疽和一些血液寄生虫病疑似病死的动物需采取血液样本，采样方法：用注射器在颈部静脉抽取5mL，放在样品容器内，不要摇动，或者滴1～2滴在玻片上，等干燥后固定，可以多做几张。
（3）对于被毛粗乱无光泽、过分消瘦的动物怀疑寄生虫病死亡的动物样品，采集方法：采集动物粪便，放在容器瓶里，或者用玻片做成压片[2]。
（4）对于染病的动物产品，如猪瘟（含非洲猪瘟）、猪丹毒等濒临死亡已被养殖业主宰杀后的病畜产品样，采集方法是采集实质病变脏器，如淋巴结、肾脏、心包、皮肤等，选择病变组织和正常组织相邻的部位，用剪刀剪下含正常组织和病变组织样品2、3块（每块5～10 g）放在10%甲醛溶液（病毒使用）或者消毒过的容器中（细菌）。
（5）对于皮肤疥癣的病料，采集方法是用刃口钝的刮刀使劲刮皮肤表面，然后将刮出的皮屑放到容器瓶内，加入70%酒精，密封盖紧。
（6）对于即将濒死的疑似非洲猪瘟病猪，用75%酒精擦拭患猪颈静脉处，然后用无菌注射器在病猪颈静脉抽取血液，放入盛有抗凝剂的采血小管中，数量达采血小管2/3处[3]。
（7）在样品采集时，采样人员穿戴好防护服、防护帽、护目镜，做好个人卫生防护。尽量采用无菌操作采集具有代表性的病料作样品。操作熟练麻利，不要污染样品及其他物品。及时填写样品登记表、标签、采样单，在样品上贴好标签（与登记表对应），用记号笔做好标记。如需加入保存剂或其他处理剂的，立即进行现场处理并清点采样数量（包括复检和留样备份）[4]。
4样品保存和送检
（1）样品保存。病样采好后，通常将病样放在有冰块的保温箱内保存，并立即送往权威机构检测。如果病样不能很快送到权威机构检测，那么根据需要加入适量的保存剂，根据检验项目种类进行相应处理。如需要血清检测的，不加抗凝血剂，将采集的血液在室温下静置至凝固，收集析出的血清，装于小瓶中，将小瓶盛装在铝盒内，在铝盒内加填塞物;需做细菌或病毒学检验的，每10 mL血液加1 mL抗凝血剂等。
（2）病样送检前開具委托检测书（简单说明目的要求以及病料病理变化及疑似病情说明、检测项目等信息），填制检测项目表和样品交接单，进行样品交接[5]。
5疑似病死动物及环境的处理
在病样送检后结果未出来前，拟定一份裁定协议后，对该采样病死畜禽严格作无害化处理，对环境和相关人员进行消毒。
6讨论与结论
6.1讨论
疑似病死畜禽动物的确诊，第一，加强检疫人员和养殖业主对动物疫病的业务知识培训，提高对疫病病理病状病征的认识;第二，强化基层检疫人员安全知识和操作技能培训，在与疑似病死畜禽动物接触时，一定要戴口罩和护目镜，穿防护服，做好个人卫生;第三，严格按规范的疑似病死畜禽动物病料样品采集、保存与送检。
6.2结论
规范的疑似病死畜禽动物样品的采集、保存和送检直接决定检测的准确性和结论的科学性，是基层动物防疫和动物公共卫生常见的工作手段，是解决防疫人员与养殖业主争执的重要依据，是做好基层防疫工作必须掌握的一门实用技术。特别是目前国内非洲猪瘟疫情频发，采集病样送与有资质的检测机构确诊是一项长期的常规性的工作，所以有必要加强样品采集保存送检的规范操作技术的普及。
参考文献
[1]毛家红.动物活体样品采集技术[J].农业灾害研究，2014，4（5）：47-48.
[2]王占伟，邵国青.兽医科学研究中的样品采集方法及其最新进展[J].中国畜牧兽医，2012，39（lO）：242-246
[3]高丽.做好猪（牛、羊）尿液样品采集工作[J].畜牧兽医科技信息，2016 （4）：97.
[4] 吕学梅.样品采集的生物安全与防范措施[J].中国动物检疫，2011，28（ 8）：54-55.
[5]齐旭俊.动物疫病检测中样品采集存在问题和解决方法[J].畜牧兽医杂志，2011，30 （6）：56-58.