【摘 要】
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目的 探讨黄芪莪术配伍联合5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗结肠癌的作用机制.方法 采用1只BALB/c雄性小鼠作为种鼠,生成原位瘤体,80只BALB/c雄性小鼠采用移植种鼠瘤体的方法建立CT26.WT原位移植瘤小鼠模型.将80只BALB/c雄性小鼠随机分为模型组、5-FU组(25 mg/kg)、黄芪莪术高剂量组(12 g/kg)、黄芪莪术中剂量组(6 g/kg)、黄芪莪术低剂量组(3 g/kg)、联合高剂量组(12 g/kg+25 mg/kg)、联合中剂量组(6 g/kg+25 mg/kg)、联合低剂量组(3
【机 构】
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南京中医药大学药学院 南京 210023;南京中医药大学中医学院 中西医结合学院;上海中医药大学基础医学院;南京中医药大学中医学院 中西医结合学院
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目的 探讨黄芪莪术配伍联合5-氟尿嘧啶(5-FU)治疗结肠癌的作用机制.方法 采用1只BALB/c雄性小鼠作为种鼠,生成原位瘤体,80只BALB/c雄性小鼠采用移植种鼠瘤体的方法建立CT26.WT原位移植瘤小鼠模型.将80只BALB/c雄性小鼠随机分为模型组、5-FU组(25 mg/kg)、黄芪莪术高剂量组(12 g/kg)、黄芪莪术中剂量组(6 g/kg)、黄芪莪术低剂量组(3 g/kg)、联合高剂量组(12 g/kg+25 mg/kg)、联合中剂量组(6 g/kg+25 mg/kg)、联合低剂量组(3 g/kg+25 mg/kg),每组10只,连续给药3周.处死小鼠取肿瘤组织,计算抑瘤率.采用Western blot和Real-time PCR法分别检测各组小鼠肿瘤组织、淋巴组织和肝脏组织中CXC趋化因子配体10(CXCL10)、CXC趋化因子受体3(CXCR3)、C-C趋化因子配体3(CCL3)、C-C趋化因子受体5(CCR5)蛋白和mRNA表达.结果 与模型组比较,各给药组的抑瘤率均升高(P<0.01).与5-FU组比较,黄芪莪术高、中、低剂量组,联合高、中、低剂量组抑瘤率均降低(P<0.01).与黄芪莪术高剂量组比较,联合高剂量组抑瘤率升高(P<0.01),黄芪莪术低剂量组抑瘤率降低(P<0.01).与黄芪莪术中剂量组比较,黄芪莪术低剂量组抑瘤率降低(P<0.01),联合中剂量组抑瘤率升高(P<0.01).与联合高剂量组比较,联合中剂量抑瘤率升高(P<0.01).与联合中剂量组比较,联合低剂量组抑瘤率降低(P<0.01).与联合低剂量组比较,黄芪莪术低剂量组抑瘤率降低(P<0.01).与模型组比较,各给药组均能下调CXCL10、CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA及蛋白的表达(P<0.01).与5-FU组比较,黄芪莪术中、低剂量组CXCL10、CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA及蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01);联合高、中、低剂量组的CXCL10、CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA及蛋白表达均降低(P<0.01);黄芪莪术高剂量组原位瘤、淋巴结、肝组织中CCL3及肝组织中CCR5的蛋白表达升高(P<0.01),黄芪莪术高剂量组CXCL10、CXCR3的mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01).与黄芪莪术高剂量组比较,联合高剂量组趋化因子及受体的mRNA及蛋白的表达降低(P<0.05);黄芪莪术中、低剂量组原位瘤、淋巴结中趋化因子及受体的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织中CXCL10、CX-CR3、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05);黄芪莪术低剂量组的趋化因子及受体的mRNA表达升高(P<0.05);黄芪莪术中剂量组CXCR3、CCL3、CCR5的mRNA表达升高(P<0.05).与黄芪莪术中剂量组比较,联合中剂量组的趋化因子及受体的mRNA及蛋白的表达降低(P<0.05);黄芪莪术低剂量组原位瘤中趋化因子及受体的蛋白的表达升高(P<0.05),淋巴结中CXCL10、CCL3的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织中CXCL10、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05);黄芪莪术低剂量组CXCL10、CCL3 mRNA表达升高(P<0.05).与联合高剂量组比较,联合低剂量组趋化因子及受体的mRNA及蛋白表达升高(P<0.05),联合中剂量组原位瘤CCL3、CXCL10的蛋白表达升高(P<0.05),淋巴结CCR5、CXCL10、CXCR3的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织中CXCL10、CXCR3的蛋白表达升高(P<0.05),联合中剂量组CXCR3 mRNA表达升高(P<0.05).与联合中剂量组比较,联合低剂量组原位瘤CXCL10、CXCR3、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05),淋巴结CXCL10、CXCR3的蛋白表达升高(P<0.05),肝组织CXCR3、CCR5的蛋白表达升高(P<0.05),联合低剂量组中CXCR3、CCL3的mRNA表达升高(P<0.05).与联合低剂量组比较,黄芪莪术低剂量组趋化因子及受体的mRNA及蛋白表达升高(P<0.05).结论 黄芪、莪术配伍能够抑制CT26.WT原位移植瘤增殖,且联合5-FU具有增效之功,其治疗结肠癌机制可能与下调CXCL10/CXCR3轴、CCL3/CCR5轴mRNA及蛋白的表达有关.
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