应用腺病毒载体系统将HBV/C全基因组转导入HepG2细胞的方法学研究

来源 :南方医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jcd041991
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目的运用腺病毒系统将HBV/C全基因组高效地导入肝癌细胞系.为研究HBV的复制及蛋白表达情况构建技术平台。方法构建libV/C基因型毒株的1.3拷贝全基因序列,运用腺病毒系统(AdEasy),首先将1.3拷贝HBV全基因序列插入到穿梭载体pAdTrack,经测序证实插入序列的正确性后用PmeI酶切线性化重组穿梭质粒,转化Adeasier-1感受态细胞.在细菌细胞内发生同源重组,所得重组腺病毒质粒pAdEasy—HBWC用PacI酶切线性化,用脂质体法转染293细胞来包装重组病毒。用适量感染复数的重组腺病毒
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