【摘 要】
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本文应用ＰＣＲ技术，选择扩增出人白介素６ｃＤＮＡ的４００ｂｐ左右片段，将此片段插入ＰＵＣ１８质粒中，经电泳检测、序列分析证实，扩增片段与发表序列一致。酶切、电泳回收纯化片段，将片段标记光敏生物素作为探针，应用
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本文应用ＰＣＲ技术，选择扩增出人白介素６ｃＤＮＡ的４００ｂｐ左右片段，将此片段插入ＰＵＣ１８质粒中，经电泳检测、序列分析证实，扩增片段与发表序列一致。酶切、电泳回收纯化片段，将片段标记光敏生物素作为探针，应用于斑点杂交检测探针的灵敏度与特异性，结果表明该人白介素６基因探针具有灵敏度高（１０ｐｇ左右）、特异性强、应用方便等特点。初步应用于几株肿瘤细胞系细胞原位杂交检测人ＩＬ－６ｍＲＮＡ表达，所得结果与文献报道一致。
In this paper, the 400bp fragment of human interleukin-6 cDNA was amplified by PCR. The fragment was inserted into PUC18 plasmid and confirmed by sequence analysis. The amplified fragment was consistent with the published sequence. The fragment was labeled with biotin and used as a probe to detect the sensitivity and specificity of the hybridization detection probe. The results showed that the human interleukin 6 gene probe has high sensitivity (about 10 pg), specificity Strong, easy to use and so on. Preliminary application in several tumor cell lines in situ hybridization detection of human IL-6mRNA expression, the results obtained consistent with the literature.
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