人热休克蛋白70在毕赤酵母中的表达及鉴定

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目的在毕赤酵母(pichia pastoris)中高效表达人热休克蛋白70(hHSP70),制备具有天然与hHSP70相同结构和活性的重组hHSP70(rhHSP70).方法用PCR法自人DNA文库中克隆hHSP70的DNA,构建真核表达载体pPICZα/hHSP70.经核酸测序确证后,电转化毕赤酵母菌株X-33.用PCR法筛选Zeocin抗性的转染阳性克隆, Western blot法鉴定甲醇诱导的培养上清液中的rhHSP70,筛选高表达工程菌.结果经PCR法克隆的hHSP70 DNA序列与Gene B
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