【摘 要】
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针对水疱性口炎病毒(VSV)N基因设计特异性引物,在引物中分别加入EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点.RT-PCR扩增后得到目的基因,将其克隆到表达载体pET30c,连接产物转化于DH5α菌株,在含K
【机 构】
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西北农林科技大学,西北农林科技大学,农业部
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针对水疱性口炎病毒(VSV)N基因设计特异性引物,在引物中分别加入EcoRⅠ和XhoⅠ酶切位点.RT-PCR扩增后得到目的基因,将其克隆到表达载体pET30c,连接产物转化于DH5α菌株,在含Kan+的平板上37 ℃培养24 h,然后挑取白色菌落,鉴定为阳性者,转化于BL21菌株,再经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导获得高效表达.表达融合蛋白分子质量为53 ku(目的蛋白大约47 ku),同预期蛋白大小相近.Western blot检测表明,其能与本病毒阳性血清发生特异性反应,表达蛋白有望成为
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