【摘 要】
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为研究胀果甘草多糖GiP-B1通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对巨噬细胞RAW 264.7免疫功能的影响,体外以TLR4干扰RNA（TLR4-siRNA）转染巨噬细胞RAW 264.7 24 h,用100μg/mL GiP-B1处理转染和未转染细胞,12 h后分别采用CCK-8和ELISA法检测GiP-B1对巨噬细胞RAW 264.7增殖和分泌炎症因子的影响,并采用RT-PCR和Wes
【基金项目】
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国家自然科学基金（81360626,81960702）；
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为研究胀果甘草多糖GiP-B1通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对巨噬细胞RAW 264.7免疫功能的影响,体外以TLR4干扰RNA（TLR4-siRNA）转染巨噬细胞RAW 264.7 24 h,用100μg/mL GiP-B1处理转染和未转染细胞,12 h后分别采用CCK-8和ELISA法检测GiP-B1对巨噬细胞RAW 264.7增殖和分泌炎症因子的影响,并采用RT-PCR和Western blot法检测GiP-B1对巨噬细胞TLR4及其信号通路下游基因MyD88、NF-κB p65、IκBα的mRNA和蛋白表达水平的影响。结果显示,与空白对照组比较,GiP-B1可显著提高巨噬细胞RAW 264.7的增殖,促进白细胞介素1β（IL-1β）、白细胞介素6（IL-6）及肿瘤坏死因子α（TNF-α）的分泌,上调TLR4、MyD88、NF-κB p65、IκBα的mRNA和蛋白表达量（P<0.05）;对各组进行TLR4基因沉默后,与正常培养的GiP-B1组比较,转染TLR4-siRNA可抑制GiP-B1诱导的巨噬细胞RAW 264.7的增殖、细胞因子的分泌以及TLR4、MyD88、NF-κB p65、IκBα的mRNA和蛋白表达水平（P<0.05）。以上结果表明,GiP-B1可活化TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,促进相关基因表达,使NF-κB进入细胞核调控相关细胞因子的转录水平,进而激活巨噬细胞的免疫功能。
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