【摘 要】
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目的 探究衰老细胞清除剂ABT-263联合替莫唑胺（TMZ）治疗胶质母细胞瘤的效果及作用机制。方法 体外培养U87MG细胞系，分为对照组（不进行干预）、TMZ组和TMZ+ABT组。应用SA-β-gal染色检测细胞的衰老；应用MTT法检测细胞活力；应用EdU染色检测细胞增殖能力；应用划痕试验检测细胞迁移能力；应用蛋白印迹法检测不同药物处理组U87MG细胞中P53、P21、Bcl-2、Bax、PARP
【机 构】
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西安交通大学第一附属医院人才高地科研平台
【基金项目】
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国家自然科学基金青年项目（82003807）；
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目的 探究衰老细胞清除剂ABT-263联合替莫唑胺（TMZ）治疗胶质母细胞瘤的效果及作用机制。方法 体外培养U87MG细胞系，分为对照组（不进行干预）、TMZ组和TMZ+ABT组。应用SA-β-gal染色检测细胞的衰老；应用MTT法检测细胞活力；应用EdU染色检测细胞增殖能力；应用划痕试验检测细胞迁移能力；应用蛋白印迹法检测不同药物处理组U87MG细胞中P53、P21、Bcl-2、Bax、PARP1和Caspase3等蛋白的表达量。应用转录组测序分析不同药物治疗组中U87MG细胞基因的表达差异。结果 与TMZ（200μmol/L）组相比，TMZ（200μmol/L）+ABT（2μmol/L）组细胞衰老率显著下降（P＜0.05）,EdU阳性细胞比例显著降低（P＜0.05）,细胞迁移速率显著减慢（P＜0.05）。与相同TMZ剂量单药给药组相比，TMZ（10μmol/L）+ABT（2μmol/L）低剂量组、TMZ（50μmol/L）+ABT（2μmol/L）中剂量组、TMZ（200μmol/L）+ABT（2μmol/L）高剂量组细胞P21蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）,细胞Bcl-2和Caspase3蛋白的表达水平均显著升高（P＜0.05）;低剂量联合给药组细胞P53蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,中、高剂量联合给药组细胞PARP1剪切体蛋白的表达水平显著升高（P＜0.05）,中、低剂量联合给药组细胞Bax蛋白的表达水平显著升高（P＜0.05）。此外，TMZ（100μmol/L）+ABT（1μmol/L或2μmol/L）组和TMZ（100μmol/L）组相比，显著改变的差异表达基因共有312个，其中上调基因141个，下调基因171个，富集分析涉及多条炎症反应以及调控细胞过程相关的通路。结论 ABT-263联合TMZ可以抑制U87MG细胞的增殖和迁移，在一定程度上清除由TMZ诱导的U87MG衰老细胞，干扰生长停滞肿瘤细胞的恢复能力，防止肿瘤复发。
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