【摘 要】
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目的探讨miR-34a过表达影响乳腺癌细胞对阿霉素（ADR）药物敏感性的机制。 方法采用实时荧光定量PCR法检测miR-34a在MCF-7和MCF-7/ADR乳腺癌细胞中的表达情况。将miR-34a模拟物及阴性对照转染MCF-7/ADR细胞，将miR-34a抑制物及阴性对照转染MCF-7细胞。采用Western blot法和实时荧光定量PCR法检测转染前后MCF-7和MCF-7/ADR细胞中Not
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目的探讨miR-34a过表达影响乳腺癌细胞对阿霉素（ADR）药物敏感性的机制。
方法采用实时荧光定量PCR法检测miR-34a在MCF-7和MCF-7/ADR乳腺癌细胞中的表达情况。将miR-34a模拟物及阴性对照转染MCF-7/ADR细胞，将miR-34a抑制物及阴性对照转染MCF-7细胞。采用Western blot法和实时荧光定量PCR法检测转染前后MCF-7和MCF-7/ADR细胞中Notch1蛋白及mRNA的表达情况。采用四甲基偶氮唑蓝法和流式细胞术检测miR-34a过表达是否影响乳腺癌细胞对ADR的敏感性。
结果MCF-7和MCF-7/ADR细胞中miR-34a的表达水平分别为1.00和0.02，MCF-7/ADR细胞较MCF-7细胞明显下调（P＜0.05）；MCF-7和MCF-7/ADR细胞中Notch1 mRNA的表达水平分别为1.00和2.10±0.20，MCF-7/ADR细胞较MCF-7细胞明显上调（P＜0.05）。MCF-7/ADR细胞转染miR-34a 模拟物后，Notch1蛋白及mRNA的表达下调；MCF-7细胞转染miR-34a抑制物后，Notch1蛋白及mRNA的表达上调。转染miR-34a抑制物和阴性对照后，ADR对MCF-7细胞的IC 50分别为（0.51±0.03）μmol/L和（0.29±0.21）μmol/L，差异有统计学意义（P＜0.05）；转染miR-34a模拟物和阴性对照后，ADR对MCF-7/ADR细胞的IC 50分别为（39.28±4.12）μmol/L和（116.33±16.80）μmol/L，差异有统计学意义（P＜0.05）。与转染阴性对照+ADR组比较，转染模拟物+ADR组MCF-7/ADR细胞的凋亡增加；转染抑制物+ADR组MCF-7细胞的凋亡减少。
结论miR-34a负向调控Notch1在mRNA和蛋白水平的表达，miR-34a过表达可增加乳腺癌细胞对ADR的药物敏感性。
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