人线粒体肌酸激酶广泛型亚型的原核表达、抗体制备及其临床应用意义

来源 :第二军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：FlamesTsui

【摘要】

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目的:在大肠杆菌中克隆表达人线粒体肌酸激酶广泛型亚型(uMtCK)的蛋白,免疫家兔制备抗uMtCK的多克隆抗体,检测胃肠肿瘤组织中uMtCK的表达.方法:采用RT-PCR从培养的肿瘤细胞(H

【作者】

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张建王爱华顾鹏飞于嘉屏

【出处】

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第二军医大学学报

【发表日期】

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2004年12期

【关键词】

：

线粒体肌酸激酶基因表达胃肠肿瘤 ubiquitous mitochondrial creatine kinasegene expression gastro

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目的:在大肠杆菌中克隆表达人线粒体肌酸激酶广泛型亚型(uMtCK)的蛋白,免疫家兔制备抗uMtCK的多克隆抗体,检测胃肠肿瘤组织中uMtCK的表达.方法:采用RT-PCR从培养的肿瘤细胞(HeLa细胞)中成功扩增出1 062 bp的uMtCK基因片段,构建重组质粒pQE30-uMtCK,转化大肠杆菌表达酶融合蛋白,对表达产物进行SDS-PAGE、Western印迹鉴定及酶活性测定.纯化的uMtCK蛋白免疫家兔制备了抗uMtCK多抗.免疫组化法检测59例胃及直肠肿瘤组织切片中uMtCK的表达.结果:RT-P

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