乙型肝炎病毒S基因密码子最佳化及在毕赤酵母中的高效表达

来源 :中华生物医学工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mandy_wang
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读

目的 制备适合酵母表达的乙型肝炎病毒S基因,在毕赤酵母中高效表达重组乙型肝炎病毒S蛋白.方法 选用酵母偏爱的同义密码子替换野生型S基因的酵母稀有密码子,采取基因搭桥法及递归式聚合酶链反应,制备合成基因,捕入酵母表达载体pPICZB.携带有合成S基因的重组质粒转化毕赤酵母菌株KM71 H,经甲醇诱导表达乙型肝炎病毒S蛋白.结果 酶切电泳及DNA测序证实合成的S基因正确克隆到表达载体中;聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹显示优化后的乙型肝炎病毒S基因在毕赤酵母中的重组蛋白表达量远高于野生型基因.结论 密码子优化的S基因能明显提高重组S蛋白在毕赤酵母表达系统中的表达量。

其他文献
英国卡迪夫大学科学家宣布,他们在成人关节的软骨组织中找到一种特定的干细胞,通过实验室培育能够产生足够多的软骨细胞,这一发现为关节炎患者和软骨损伤患者带来了新的治疗希望。
期刊
尾加压素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)是一种具有广泛生物学效应的血管活性肽.它最初是从鱼的脊髓尾垂体中分离出来的生长抑素样环肽[1]。
期刊
美国耶鲁大学和奥斯瑞根(Asuragen)公司研究人员发现,一种名为let-7的微小核糖核酸(miRNA)分子,能够持续减缓多种患有不同类型肺癌的小鼠模型中的肿瘤生长。这项成果刊登在最近的《细胞周期》杂志上。研究人员称,这是关于微小RNA分子可有效治疗包括最致命的肺癌在内的任何癌症的第一篇报道。
期刊
为提高广大眼科科研工作者对眼科基础研究的实际操作技术,帮助眼科工作者制定眼科基础研究的方向及研究目标,天津医科大学眼科中心与Overseas Chinese Association for Vision and Eye Research将于2010年9月13日-14日联合举办眼科基础研究培训班。
期刊
据科技日报的消息,在不远的将来,临床医生不必东找西寻,只需从患者头上拔根头发,就能进行血管再生手术,因为通过生物工程,头发毛囊中富含的干细胞可以发育成新的血管或皮肤组织。美国纽约州立大学水牛城分校的科学家发表的最新研究成果已经证明,头发毛囊中含有大量的干细胞,是最容易获得的干细胞来源之一。旁路手术(如心脏搭桥手术)对工程血管的迫切需求,促使科学家寻找利用干细胞来生成新的血管或皮肤组织的方法。
期刊
胃肠道间质瘤(GIST)是胃肠道最常见的间叶组织性肿瘤,具有非定向分化的特性,由于组织分化程度的不同,有着不同的组织学、形态学和预后特征.20世纪90年代以前所报道的所谓平滑肌瘤、神经内分泌肿瘤经再次免疫组化证实85%以上为间质瘤[1].为了使临床医师对GIST有一个总体认识,本文仅对GIST的发生机制诊断及治疗现状作一简要概述。
期刊
目的 研究小鼠阴道黏膜干细胞的分离、富集和鉴定方法,为干细胞替代疗法或构建人工阴道黏膜治疗先天性无阴道提供依据.方法 取7~8周龄小鼠的阴道黏膜上皮,用酶消化培养法原代培养阴道黏膜千细胞(VMSC).用Ⅳ型胶原黏附法并连续传代分离和富集VMSC.显微镜下动态观察细胞生长特性;苏木精-伊红(HE)染色;透射电镜观察细胞超微结构;荧光显微镜下观察标记滞留细胞(LRc).免疫组化SP法检测细胞表面标记物
根据近来的报道,全世界有5 000 000人感染人类免疫缺陷病毒(HIV),3 000 000人死于艾滋病(获得性免疫缺陷综合征,AIDS).HIV的广泛流行将给全人类的健康带来严重的危害.因此,研发一种安全而有效的HIV疫苗是预防艾滋病的有效且经济的方法。
期刊
我国著作权法公布以来,已得到社会各界的广泛重视,作为医学科技期刊必须不折不扣地执行著作权法。为此将本刊对作者署名和志谢的有关要求重申如下。
期刊
目的 对生物玻璃-纳米羟基磷灰石(BG-nHA)梯度涂层的生物相容性作初步的评价.方法 用低温烧结法在钛合金表面制备生物玻璃纳米羟基磷灰石梯度涂层,利用L929细胞检测梯度涂层材料的细胞毒性.取体外分离培养扩增的人骨髓基质干细胞(hBMSC),接种于涂层材料上,通过绿色荧光蛋白染色、扫描电镜和MTT法观察细胞的黏附和生长情况.结果 生物玻璃-纳米羟基磷灰石梯度涂层的细胞毒性分级为1级,人骨髓基质干