【摘 要】
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目的研究三七总皂苷(PNS)对K562细胞增殖、凋亡、周期的影响及其相关分子机制。方法采用MTT法检测PNS对K562细胞增殖的影响;AO/EB双荧光染色法及Annexin V-FITC/PI双染色法观
【机 构】
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蚌埠医学院医学检验系,安徽医科大学基础医学院,NorthwesternUniversity
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目的研究三七总皂苷(PNS)对K562细胞增殖、凋亡、周期的影响及其相关分子机制。方法采用MTT法检测PNS对K562细胞增殖的影响;AO/EB双荧光染色法及Annexin V-FITC/PI双染色法观察细胞凋亡及死亡状况;流式细胞术检测K562细胞的周期变化;RT-PCR检测m TOR信号通路主要分子m RNA的表达变化;Western blot检测cleaved caspase-3蛋白、cyclin D1蛋白及m TOR信号通路主要蛋白及磷酸化蛋白的表达量变化。结果 100~800μg/m L的PNS作用于K562细胞后能够抑制细胞增殖。PNS能够上调cleaved caspase-3蛋白表达,促使K562细胞发生凋亡。并且下调cyclin D1蛋白表达,促使K562细胞阻滞在G0/G1期。同时,PNS能够抑制K562细胞m TOR m RNA表达,降低m TOR蛋白和磷酸化蛋白p-m TOR(Ser2448)、pp70S6K(Thr229/389)及p-4E-BP1(Thr37/46)的表达,从而抑制m TOR信号通路活性。结论 PNS对体外培养K562细胞有抑制增殖,促进凋亡,使其发生周期阻滞的作用。其机制可能与PNS抑制m TOR信号通路活性、上调cleaved caspase-3蛋白表达及抑制cyclin D1蛋白表达有关。
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