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摘要：目的： 探讨ER、PR、Ki-67在子宫内膜样腺癌中的表达及其与组织学分级的相关性。方法：应用免疫组织化学法回顾分析了114例子宫内膜样腺癌患者石蜡标本中ER、PR、Ki-67的表达，并对其组织学类型进行分析。结果： ER、PR、Ki-67的阳性表达率分别为84.2%（96/114）、76.3%（87/114）、91.2%（104/114），ER、PR在在中-低分化组的阳性表达率明显低于高分化组，有统计学差异。Ki-67在高分化子宫内膜样腺癌组织中阳性表达低于中-低分化，但无统计学差异。子宫内膜样腺癌组织中，ER和PR表达具有相关性。结论： ER、PR、Ki-67在子宫内膜样腺癌中的表达与子宫内膜癌的生物学行为有关，可联合应用作为子宫内膜癌的预后指标。
关键词：子宫内膜癌 雌激素受体（ER） 孕激素受体（PR） 细胞增殖核抗原（Ki-67） 免疫组织化学
子宫内膜癌是妇科常见恶性肿瘤之一，目前以分段诊断性刮宫作为病理基础，以手术为主要的治疗方法。现研究提示，与子宫内膜癌相关的病理因素有：病理组织学分类、组织学分级、肌层浸润深度及淋巴结转移等。随着分子生物学的不断发展，对子宫内膜癌在分子水平致癌机制的研究逐步深入，通过与传统的手术病理因素联合检测，从而寻找各种能够准确预测子宫内膜癌发生发展及预后的相关因素。其中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、细胞增殖核抗原（Ki-67）等均为国内外研究的热门之一。本研究利用免疫组化技术检测子宫内膜样腺癌中ER、PR、Ki-67的表达，探讨其临床意义。
1. 资料与方法
1.1 病例资料
收集2010年1月至2014年10月在川北医学院附属医院手术切除病病理证实的子宫内膜癌120例，患者年龄32-79岁，平均年龄54.7。组织学分类采用世界卫生组织（WHO）的标准，其中子宫内膜样腺癌114例，腺鳞癌3例，乳头状腺癌1例，透明细胞癌1例，腺棘癌1例，由于后四种例数较少，缺乏统计学意义，故只选取子宫内膜样腺癌作为分析：其中高分化92例，中分化17例，低分化5例。
1.2 方法
手术标本经10%甲醛固定，石蜡包埋，制成4？m切片，常规HE染色。免疫组化采用Elivison二步法，免疫组化操作按说明书进行。鼠抗人ER单克隆抗体、鼠抗人PR受体单克隆抗体、鼠抗人Ki-67单克隆抗体，免疫组化Elivison二步法试剂盒、DAB酶底物显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。采用TBS缓冲液代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判断
ER、PR蛋白以细胞核着色为阳性，单纯胞浆着色而无核内着色不作阳性。Ki-67蛋白以细胞核着色或细胞核、细胞浆同时着色为阳性。阳性细胞表达数≤5%为阴性（-），6%～25%弱阳性（+），26～50%中度阳性（++），>50%强阳性（+++），（+）～（+++）均为阳性。
1.4 统计分析
所有数据均采用SPSS19.0统计软件，统计学处理采用X2检验和Spearman等级相关分析，以p<0.05为差异显著性判断标准。
2 结果
2.1 ER、PR、Ki-67在子宫内膜样腺癌不同组织学分级中表达
ER蛋白的阳性率随着分级逐渐下降，由高分化的88.1降为中-低分化的68.2%，差异有显著性（p<0.05）。PR蛋白的阳性率随着分级逐渐下降，由高分化的81.5降为中-低分化的54.5%，差异有显著性（p<0.01）。Ki-67蛋白的阳性率随着分级逐渐升高，由高分化的90.2%升至中-低分化的95.5%，但差异无显著性（p>0.05）。
2.2 ER、PR、Ki-67在子宫内膜样腺癌不同组织学分级中的相关性无论高分化还是中-低分化子宫内膜样腺癌组织中，ER和PR表达都具有相关性（P<0.01），Ki-67与PR和ER表达无相关性（p>0.05）。
3.讨论
ER和PR广泛存在子宫内膜组织细胞中，是子宫内膜接受雌激素和孕激素统一调节的物质基础，正常子宫内膜的ER、PR双阳性率为90%～100%[1]。Kalogiannidis[2]等的研究显示，在子宫内膜样腺癌中ER和PR表达下降。另有研究表明：ER、PR阳性率和组织学分级有密切关系，肿瘤分化程度越差者，激素受体阳性率越低[3，4]。本研究与报道一致，114例子宫内膜样腺癌组织中ER、PR蛋白的阳性率随着分级逐渐下降，差异有显著性（p<0.05）。说明ER、PR的丢失与增加细胞恶性转变有关系，另一方面，激素受体的存在说明肿瘤细胞的功能尚未完全丧失，对性激素的刺激仍有一定的反应，这为内分泌治疗提供必须的基础和获得疗效的保证。
Ki-67是目前较为肯定的细胞核增殖标记物，有文献报道，Ki-67在子宫内膜癌中表达随着组织学分级、临床分期、肌层浸润深度及淋巴结转移的发生率的增高而增强[5]。本结果显示，Ki-67的表达虽然在不同组织分化中无显著性差异（P>0.05），但随着组织分级逐渐升高，Ki-67蛋白的阳性率由高分化的90.2%升至中-低分化的95.5%。
ER、PR、Ki-67在子宫内膜癌中是否具有相关性目前还不清楚，有研究表明：ER、PR成正相关，PR、Ki-67成负相关[6]。本研究表明：无论在高分化还是中-低分化子宫内膜样腺癌组织中，ER和PR表达都具有相关性（P<0.01），Ki-67与PR和ER表达无相关性（p>0.05）。
综上所述，ER、PR、Ki-67蛋白的异常表达可能是子宫内膜组织恶性转变的重要生物学标志，具有预后意义，可联合应用作为子宫内膜癌的预后指标。
参考文献：
[1]李汉萍，李诚信.妇科恶性肿瘤的性激素治疗[J].中国实用妇科和产科杂志，2006，7（3）：122-123.
[2]Kalogiannidis I，Bobos M，Papanikolaou A，et al. Immunohistochemical bcl-2 expression，P53 over-expression，PR and ER status in endometrial carcinoma and survival outcomes[J].Eur J Cynaecol Oncol，2008，29（1）：19-25.
[3]姚远洋，徐文展，王悦，等.子宫内膜癌分子标志物与临床病理特征及预后的关系[J].北京大学学报（医学版），2011，43（5）：743-748.
[4]杨达平，陈红秋，粟连秀，等.ER、PR在子宫内膜癌中的表达及其临床意义[J].右江民族医学院学报，2009，31（3）：428-429.
[5]娄雪玲，周梅玲，张占薪.雌激素受体、孕激素受体、C-erbB-2和Ki-67在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理相关性[J].中国实用妇科与产科杂志，2014，30（7）：557-560.
[6]呼君瑜.ER、PR、p53、Survivin、Ki-67在子宫内膜癌中的表达及临床意义——附124例子宫内膜癌病例分析[D].河北医科大学，2009.
关键词：子宫内膜癌 雌激素受体（ER） 孕激素受体（PR） 细胞增殖核抗原（Ki-67） 免疫组织化学
子宫内膜癌是妇科常见恶性肿瘤之一，目前以分段诊断性刮宫作为病理基础，以手术为主要的治疗方法。现研究提示，与子宫内膜癌相关的病理因素有：病理组织学分类、组织学分级、肌层浸润深度及淋巴结转移等。随着分子生物学的不断发展，对子宫内膜癌在分子水平致癌机制的研究逐步深入，通过与传统的手术病理因素联合检测，从而寻找各种能够准确预测子宫内膜癌发生发展及预后的相关因素。其中雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、细胞增殖核抗原（Ki-67）等均为国内外研究的热门之一。本研究利用免疫组化技术检测子宫内膜样腺癌中ER、PR、Ki-67的表达，探讨其临床意义。
1. 资料与方法
1.1 病例资料
收集2010年1月至2014年10月在川北医学院附属医院手术切除病病理证实的子宫内膜癌120例，患者年龄32-79岁，平均年龄54.7。组织学分类采用世界卫生组织（WHO）的标准，其中子宫内膜样腺癌114例，腺鳞癌3例，乳头状腺癌1例，透明细胞癌1例，腺棘癌1例，由于后四种例数较少，缺乏统计学意义，故只选取子宫内膜样腺癌作为分析：其中高分化92例，中分化17例，低分化5例。
1.2 方法
手术标本经10%甲醛固定，石蜡包埋，制成4？m切片，常规HE染色。免疫组化采用Elivison二步法，免疫组化操作按说明书进行。鼠抗人ER单克隆抗体、鼠抗人PR受体单克隆抗体、鼠抗人Ki-67单克隆抗体，免疫组化Elivison二步法试剂盒、DAB酶底物显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。采用TBS缓冲液代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判断
ER、PR蛋白以细胞核着色为阳性，单纯胞浆着色而无核内着色不作阳性。Ki-67蛋白以细胞核着色或细胞核、细胞浆同时着色为阳性。阳性细胞表达数≤5%为阴性（-），6%～25%弱阳性（+），26～50%中度阳性（++），>50%强阳性（+++），（+）～（+++）均为阳性。
1.4 统计分析
所有数据均采用SPSS19.0统计软件，统计学处理采用X2检验和Spearman等级相关分析，以p<0.05为差异显著性判断标准。
2 结果
2.1 ER、PR、Ki-67在子宫内膜样腺癌不同组织学分级中表达
ER蛋白的阳性率随着分级逐渐下降，由高分化的88.1降为中-低分化的68.2%，差异有显著性（p<0.05）。PR蛋白的阳性率随着分级逐渐下降，由高分化的81.5降为中-低分化的54.5%，差异有显著性（p<0.01）。Ki-67蛋白的阳性率随着分级逐渐升高，由高分化的90.2%升至中-低分化的95.5%，但差异无显著性（p>0.05）。
2.2 ER、PR、Ki-67在子宫内膜样腺癌不同组织学分级中的相关性无论高分化还是中-低分化子宫内膜样腺癌组织中，ER和PR表达都具有相关性（P<0.01），Ki-67与PR和ER表达无相关性（p>0.05）。
3.讨论
ER和PR广泛存在子宫内膜组织细胞中，是子宫内膜接受雌激素和孕激素统一调节的物质基础，正常子宫内膜的ER、PR双阳性率为90%～100%[1]。Kalogiannidis[2]等的研究显示，在子宫内膜样腺癌中ER和PR表达下降。另有研究表明：ER、PR阳性率和组织学分级有密切关系，肿瘤分化程度越差者，激素受体阳性率越低[3，4]。本研究与报道一致，114例子宫内膜样腺癌组织中ER、PR蛋白的阳性率随着分级逐渐下降，差异有显著性（p<0.05）。说明ER、PR的丢失与增加细胞恶性转变有关系，另一方面，激素受体的存在说明肿瘤细胞的功能尚未完全丧失，对性激素的刺激仍有一定的反应，这为内分泌治疗提供必须的基础和获得疗效的保证。
Ki-67是目前较为肯定的细胞核增殖标记物，有文献报道，Ki-67在子宫内膜癌中表达随着组织学分级、临床分期、肌层浸润深度及淋巴结转移的发生率的增高而增强[5]。本结果显示，Ki-67的表达虽然在不同组织分化中无显著性差异（P>0.05），但随着组织分级逐渐升高，Ki-67蛋白的阳性率由高分化的90.2%升至中-低分化的95.5%。
ER、PR、Ki-67在子宫内膜癌中是否具有相关性目前还不清楚，有研究表明：ER、PR成正相关，PR、Ki-67成负相关[6]。本研究表明：无论在高分化还是中-低分化子宫内膜样腺癌组织中，ER和PR表达都具有相关性（P<0.01），Ki-67与PR和ER表达无相关性（p>0.05）。
综上所述，ER、PR、Ki-67蛋白的异常表达可能是子宫内膜组织恶性转变的重要生物学标志，具有预后意义，可联合应用作为子宫内膜癌的预后指标。
参考文献：
[1]李汉萍，李诚信.妇科恶性肿瘤的性激素治疗[J].中国实用妇科和产科杂志，2006，7（3）：122-123.
[2]Kalogiannidis I，Bobos M，Papanikolaou A，et al. Immunohistochemical bcl-2 expression，P53 over-expression，PR and ER status in endometrial carcinoma and survival outcomes[J].Eur J Cynaecol Oncol，2008，29（1）：19-25.
[3]姚远洋，徐文展，王悦，等.子宫内膜癌分子标志物与临床病理特征及预后的关系[J].北京大学学报（医学版），2011，43（5）：743-748.
[4]杨达平，陈红秋，粟连秀，等.ER、PR在子宫内膜癌中的表达及其临床意义[J].右江民族医学院学报，2009，31（3）：428-429.
[5]娄雪玲，周梅玲，张占薪.雌激素受体、孕激素受体、C-erbB-2和Ki-67在子宫内膜癌中的表达及其与临床病理相关性[J].中国实用妇科与产科杂志，2014，30（7）：557-560.
[6]呼君瑜.ER、PR、p53、Survivin、Ki-67在子宫内膜癌中的表达及临床意义——附124例子宫内膜癌病例分析[D].河北医科大学，2009.