基于网络药理学与实验验证探讨益气通脉方治疗缺血性中风作用机制

来源 :中药药理与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guo4502332
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目的:基于网络药理学、分子对接及动物实验验证探讨益气通脉方治疗缺血性中风的作用机制,旨在为其基础研究及临床应用提供依据。方法 :经由TCMSP、ETCM、TCMID、BATMAN、SwissADME、SwissTargetPrediction数据库确定中药活性成分及作用靶点;于DisGeNET、DIGSEE、DRUGBANK、GeneCards、OMIM数据库筛选疾病相关靶点;通过STRING11.5数据库获得蛋白互作网络;采用Metascape数据库对靶点进行富集分析;Cytoscape 3. 9.0软件分别构建“中药-成分-靶点”、“蛋白互作”、“成分-靶点-通路”网络图;采用SYBYL-X2.1.1及PYMOL软件进行分子对接研究。通过MCAO大鼠模型进行相关验证,采用mNSS评分方法观察各组大鼠行为学变化,计算脑组织含水量,TTC染色、HE染色及TUNEL染色检测脑组织梗死区面积、神经细胞形态学变化与凋亡比,ELISA、Western Blot法检测脑组织相关蛋白表达。结果 :通过网络药理学分析,预测益气通脉方主要活性成分槲皮素、β-谷甾醇、山柰酚、木犀草素、豆甾醇等,可能通过IL-6、AKT1、VEGFA、MAPK3、TNF、JUN、IL-1β、TP53等靶点,作用于IL-17、TNF、PI3K-AKT、MAPK等信号通路从而治疗缺血性中风,分子对接结果显示,益气通脉方中潜在核心活性成分槲皮素、β-谷甾醇、木犀草素、豆甾醇与主要靶点TNF、IL-6、IL-1β、VEGFA、MAPK3结合活性较强。动物实验方面,与假手术对照组比较,模型对照组大鼠mNSS评分、脑梗死面积、脑含水量、细胞凋亡比、缺血区脑组织中TNF-α、IL-1β、IL-18、NF-κBp65、NLRP3、ASC、Caspase-1表达显著升高(P<0.01);与模型对照组比较,除银杏叶片6.48 mg/kg组大鼠脑组织TNF-α、Caspase-1降低不明显,各药物组大鼠上述指标均明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:基于网络药理学预测、分子对接及动物实验验证等研究方法,发现益气通脉方可通过多组分、多靶点的特点,从抗炎、抗氧化、抗血栓,抗凋亡等多通路途径发挥治疗缺血性中风的作用,干预NF-κB信号通路与NLRP3炎性体轴可能是其主要作用机制之一。
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