含TK-IES-ES非融合基因重组腺相关病毒的构建及其功能的初步鉴定

来源 :基础医学与临床 | 被引量 : 0次 | 上传用户:youki2008
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目的 探讨重组腺相关病毒(rAAV)-胸苷激酶(TK)-核糖体插入位点(IRES)-内皮抑素(ES)(简称rAAV-TIE)非融合载体的构建及每个目的基因相应生物学效应的初步鉴定 方法 (1)用PCR分别扩增IRES、TK、ES序列至pMD-19T simple载体,构建pAAV-TK-IRES-ES;(2)分别采用AAV-Helper free system包装系统、“氯仿-PEG/NaCl沉淀-氯仿抽提”及冰乙醇沉淀法进行AAV的包装、纯化和浓缩。(3)用T24细胞及人脐静脉内皮细胞(HUVEC)对r
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