【摘 要】
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目的:探讨DNA甲基化修饰对非洲爪蛙三个胚层分化的影响.方法:用30μmol/L的5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-AZA-CdR)处理胚胎,抑制早期胚胎细胞内DNA甲基化转移酶1(DNA methyltransfer
【机 构】
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河南科技大学基础医学院医学遗传学教研室,河南洛阳471000;南京医科大学医学遗传学系,江苏南京211166
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目的:探讨DNA甲基化修饰对非洲爪蛙三个胚层分化的影响.方法:用30μmol/L的5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-AZA-CdR)处理胚胎,抑制早期胚胎细胞内DNA甲基化转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)的活性,观察胚胎的表型,并收集原肠期胚胎通过原位杂交检测三胚层标记基因的表达情况;显微注射DNMT1特异的反义寡核苷酸(DNMT1MO)以敲降胚胎细胞内DNMT1的表达,然后通过原位杂交检测胚层标记基因的表达情况.结果:5-AZA-CdR处理导致胚胎早期发育异常,抑制中胚层标记基因Xbra的表达.敲降DNMT1促进背部中胚层标记基因GSC和Chordin的表达,抑制腹部中胚层标记基因Wnt8的表达.结论:DNA甲基化转移酶参与调节非洲爪蛙三胚层分化形成的过程.
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