慢病毒介导的NOB1基因沉默对人结肠癌细胞增殖及凋亡的影响

来源 :中华胃肠外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:czd1986624
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目的 探讨RNA干扰技术沉默人NOB1基因对人结肠癌RKO细胞增殖和凋亡的影响.方法 设计靶向NOB1基因的小干扰RNA(siRNA),构建NOB1基因特异性的RNA干扰慢病毒载体,感染RKO细胞,并设置阴性对照组.实时定量PCR和Western blot分别检测两组细胞NOB1 mRNA及蛋白的表达情况;Cellomics ArrayScan VTI HCS高内涵分析仪检测感染细胞的增殖和克隆形成能力;流式细胞术检测细胞周期及凋亡的变化;裸鼠成瘤实验检测NOB1-siRNA对肿瘤的抑制作用.结果 NOB1-shRNA慢病毒感染RKO细胞3d后,与阴性对照组比较,NOB1 mRNA和蛋白的表达明显降低,克隆形成数减少,而细胞凋亡数增加(均P<0.05).裸鼠成瘤实验结果显示,NOB1-shRNA感染组裸鼠移植瘤体积为(405±102)mm3,小于阴性对照组的(870±165)mm3(P<0.05).结论 通过RNA干扰方式沉默NOB1基因的表达,有望作为抑制结肠癌发展的有效手段。

其他文献
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结直肠癌患者发生肺转移一直被认为是结直肠癌的晚期事件,预后不良.而分析结直肠癌肺转移手术或非手术治疗患者的预后因素,根据预后因素分析结果选择正确的治疗方案,从而提高结直肠癌肺转移患者的生存期一直是困扰医生的难题.了解预后因素,对该类患者的治疗非常重要。
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