重组质粒pIRES—GM—CSF—IL-21的构建及其治疗小鼠肝癌移植瘤的疗效

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目的构建重组质粒plRES—GM—CSF—IL-21,观察其在小鼠体内的抑瘤作用。方法将体外培养的肝癌H22细胞接种于小鼠肝左叶,成瘤后,将小鼠分为5组,每组10只,分别尾静脉注射重组质粒plRES—GM—CSF—IL-21、plRES-GM—CSF、plRES—IL-21、plRES和PBS,观察各组荷瘤小鼠的肿瘤生长情况以及GM—CSF和IL-21的抗肿瘤效应。采用酶联免疫吸附法检测小鼠血清γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素2(IL-2)的含量。采用四甲基偶氮唑蓝法检测小鼠脾脏自然杀伤细胞(NK)和细胞毒T淋巴细胞(CTL)的活性。结果H22组、H22/Neo组、H22/GM—CSF组、H22/IL-21组和H22/GM-CSF—IL-21组小鼠的肿瘤重量分别为(1.591±0.280)g、(1.489±0.155)g、(0.603±0.223)g、(0.583±0.290)g和(0.303±0.323)g,H22/GM—CSF—IL-21组、H22/IL-21组和H22/GM-CSF组小鼠的肿瘤重量明显低于H22组和H22/Neo组(P〈0.01),H22/GM—CSF—IL-21组小鼠的肿瘤重量明显低于H22/GM—CSF组和H22/IL-21组(P〈0.05)。与H22/GM—CSF组和H22/IL-21组比较,H22/GM—CSF-IL-21组小鼠血清中IFN-γ和IL-2的浓度显著升高(P〈0.01),而H22组和H22/Neo组小鼠血清中IFN-γ和IL-2的浓度显著降低(P〈0.01)。与H22/GM—CSF组和H22/IL-21组比较,H22/GM-CSF—IL-21组小鼠脾脏CTL和NK细胞的杀伤活性显著增强(P〈0.01),而H22组和H22/Neo组小鼠脾脏CTL和NK细胞的杀伤活性显著降低(P〈0.01)。结论重组质粒pIRES-GM—CSF-IL-21对小鼠肝癌移植瘤具有明显的抗肿瘤效应,并能促进小鼠体内IFN-γ和IL-2的分泌,增强脾脏中NK和CTL细胞的活性,其效果优于单一GM—CSF或IL-21基因治疗。

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