目的研究内源性大麻素N-花生四烯酸氨基乙醇（AEA）对结肠癌细胞系CaCo-2增殖及凋亡的影响，阐明CBl受体和脂筏所起的作用，进一步明确大麻素系统在结肠癌发生、发展中的作用及其分子机制。方法分别以不同浓度的AEA、AEA＋SRl41716A（CBI受体拮抗剂）、AEA＋AM630（CB2受体拮抗剂）和AEA甲基-B-环糊精（MCD，脂筏的耗竭剂）孵育结肠癌细胞CaCo-2。采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖活性，annexinVPE-7AAD双染流式细胞术检测细胞的凋亡，利用Westernblot方法检测CBI、CB2、磷酸化蛋白激酶B（p-AKT）和caspase-3蛋白的表达。结果AEA呈剂量依赖性地抑制结肠癌细胞CaCo-2的增殖，5、10、20、40μmol／I。AEA的抑制率分别为（21．52±0．45）％、（42．16±0．21）％、（73．64±0．73）％和（83．28±0．71）％。SRl41716A和MCD均能拮抗AEA所导致的增殖抑制效应。20μmol／LAEA、20μmol／LAEA＋10μmoL／LSR141716A及20μmol／LAEA＋1mmol／LMCD的细胞增殖抑制率分别为（73．64±0．73）％、（16．15±0．75）％和（12．58±0．63）％。流式细胞术检测结果照示，AEA可致CaCo-2细胞凋亡，H只有MCD能有效地拈抗AEA所致的CaCo-2细胞凋亡。对照组、20μmol／LAEA组和20μmol／LAEA＋1mmol／LMCD组的细胞凋亡率分别为（2．95±0．73）％、（39．61±0．73）％和（14．10±0．64）％。Western blot检测结果显示，CB1、CB2、p-AKT及caspase-3蛋白在CaCo-2细胞中均有表达。AEA可抑制p-AKT的表达，促进caspase－3蛋白的表达，这两种效应均能被MCD拮抗。SR141716A能拮抗AEA对p-AKT蛋白表达的抑制作用。结论内源性大麻素AEA可以有效地抑制结肠癌细胞CaCo-2的增殖并促进其凋亡，其抑制增殖的效应通过CBl受体和脂筏介导，促凋亡效应通过脂筏介导。大麻素系统在结肠癌的发生、发展中起重要作用，其中脂筏尤为关键。
N-花生四烯酸氨基乙醇通过CB1受体及脂筏介导抑制结肠癌细胞的生长
【摘 要】
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目的研究内源性大麻素N-花生四烯酸氨基乙醇（AEA）对结肠癌细胞系CaCo-2增殖及凋亡的影响，阐明CBl受体和脂筏所起的作用，进一步明确大麻素系统在结肠癌发生、发展中的作用及其分子机制。方法分别以不同浓度的AEA、AEA＋SRl41716A（CBI受体拮抗剂）、AEA＋AM630（CB2受体拮抗剂）和AEA甲基-B-环糊精（MCD，脂筏的耗竭剂）孵育结肠癌细胞CaCo-2。采用四甲基偶氮唑蓝（M
【机 构】
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武汉市中心医院消化内科,430014,武汉市中心医院消化内科,430014,武汉市中心医院消化内科,430014,武汉市中心医院消化内科,430014
【发表日期】
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2011年33期
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