淫羊藿苷调节PTEN激活成骨基因表达缓解大鼠骨质疏松症的实验研究

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目的:探讨淫羊藿苷(ICA)调节PTEN激活成骨基因表达缓解大鼠骨质疏松症(OP)的相关作用机制。方法:术中收集患骨质疏松症和骨质正常者股骨骨髓8 mL,诱导骨髓间质干细胞(BMSCs)成骨分化14 d后,采用qRT-PCR检测PTEN的表达;随后选取7周龄的雌性大鼠36只,采用经典的雌性大鼠卵巢切除法复制绝经后骨质疏松症大鼠模型,术后12周鉴定为骨质疏松模型后开始给药干预,在同等饲养条件下造模大鼠以ICA处理或/和抑制PTEN表达治疗10周后,采取颈椎脱臼法处死大鼠,取双侧股骨干骺端骨组织,采用qRT-PCR法检测大鼠骨组织中PTEN及成骨基因(RUNX2、OPN)的表达、Western blot法检测成骨标志蛋白(RUNX2、OPN)的表达,并制成石蜡切片,采用IHC染色观察PTEN在细胞中的表达、HE染色观察骨组织微观结构。结果:PTEN在OP患者骨组织中高表达,诱导BMSCs成骨分化14 d后表达被抑制,造模组大鼠骨组织中PTEN表达也较高,IHC染色见细胞中PTEN表达呈阳性、HE染色骨小梁明显稀疏;ICA处理或/和抑制PTEN表达后PTEN的表达被显著抑制,同时逆转了其对成骨基因表达的抑制作用,HE染色显示骨质疏松大鼠经ICA处理或/和抑制PTEN表达后骨小梁增多、排列紧密,部分新生骨组织形成,可有效缓解大鼠骨质疏松症。结论:ICA可有效抑制PTEN激活成骨基因表达,促进BMSCs成骨分化,缓解大鼠骨质疏松症。
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