目的基于γ干扰素释放试验(IGRA),利用流式荧光免疫分析法建立一种检测结核分枝杆菌(TB感染的新方法。方法分别用植物凝集素(PHA)、TB特异性混合多肽[早期分泌靶向抗原(ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)]刺激全血标本产生γ干扰素(IFN-γ),用双抗体夹心法结合流式荧光技术检测培养后血浆中的IFN-γ浓度,使用受试者工作特征(ROC)曲线评价其对TB感染的诊断效能。对该方法的线性范围、最低检测限、重复性、抗干扰性能及其与市售同类产品检测的一致性进行评价。结果流式荧光免疫分析法检测IFN-γ的线性范围为2～1 000 pg/mL,最低检测限为0.3 pg/mL;检测100 pg/mL和500 pg/mL 2个浓度标本的重复性,2个浓度下变异系数分别为4.58%和2.46%;回收试验平均回收率为98.0%;三酰甘油≤50 mg/mL、胆红素≤0.6 mg/mL、血红蛋白≤10 mg/mL时对流式荧光免疫分析法检测结果无干扰。通过ROC曲线确定该方法诊断TB感染的最佳截断值为10 pg/mL,此时灵敏度为82.46%,特异度为87.30%。该方法与市售TB感染T淋巴细胞斑点试验(T-SPOT)试剂盒、QuantiFERON-TB Gold(QFT)试剂盒和万泰TB-IGRA试剂盒诊断TB感染的总符合率分别为92.5%、83.0%和85.4%,Kappa系数分别为0.822、0.622和0.630。结论本研究建立的TB感染检测方法性能良好,准确性达到市售同类产品的水平,且在重复性、检测流程等方面具有明显优势。