大葱RAPD反应体系的优化

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研究了大葱基因组DNA的提取方法,并对Mg^2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq酶用量进行了优化,建立了RAPD最佳反应体系,即20μl反应体系中10×Buffer缓冲液2μl,Mg^2+浓度2.5mmol/L,dNTPs浓度0.22mmol/L,引物浓度0.65μmol/L,Taq酶1U(2.5U/μl),模板DNA 60ng,用灭菌超纯水补足20μl。扩增程序为:94℃预变性3min;94℃变性40s,38℃退火45S,72℃延伸1min,40个循环;最后72℃延伸10min。
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