不同耐药性鲍曼不动杆菌分泌的外膜泡毒力比较

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目的

比较不同耐药性鲍曼不动杆菌分泌的外膜泡(OMVs)的毒力。

方法

提取、纯化4株不同耐药性鲍曼不动杆菌(菌株33、3237、B29和10)分泌的OMVs,BCA法定量后,使用不同浓度的OMVs刺激RAW264.7细胞24 h,CCK-8试剂检测OMVs的细胞毒性,q-PCR法检测细胞因子,包括肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6、IL-1β、角化细胞源性生长因子(KC)和巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)的表达,并采用单因素方差分析进行统计学比较。

结果

药敏试验结果显示,菌株10为泛耐药鲍曼不动杆菌(XDRAB),菌株B29为多重耐药鲍曼不动杆菌(MDRAB),而菌株33和3237为非MDRAB。将不同浓度OMVs与RAW264.7细胞共孵育24 h后,细胞存活率随着OMVs浓度增加而降低。其中,菌株10、B29、3237产生的OMVs在5 μg/mL时可引起明显的细胞死亡,而菌株33产生的OMVs毒力明显低于其他菌株,在25 μg/mL时细胞存活率仍未见明显降低。4株鲍曼不动杆菌分泌的OMVs均能刺激RAW264.7细胞分泌细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、KC和MIP-2,且随着OMVs浓度增加,细胞因子的表达水平也增加。菌株33分泌的OMVs促炎能力最低,菌株10分泌的OMVs促炎能力最高,且在5 μg/mL时,菌株10产生的OMVs促进KC、MIP-2表达的能力急剧上升,明显高于其他菌株(F=19.094和19.032,P<0.05或<0.01)。

结论

不同耐药性鲍曼不动杆菌分泌的OMVs毒力各不相同,其中泛耐药和多重耐药菌株分泌的OMVs具有较强的细胞毒力以及促炎能力。

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