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目的
探讨miR-492是否参与红细胞OK血型抗原表达的转录后调控。
方法化学合成2个BSG基因3′ UTR片段，分别包含BSG rs 8259 TT或BSG rs 8259 AA位点。合成时两端加上XhoⅠ和NotⅠ酶切位点，克隆至pUC57载体，随后构建至psiCHECK-2载体，测序验证。分别将不同浓度的miR-492 mimic与构建的psiCHECK2-BSG-T或psiCHECK2-BSG-A重组质粒共转染K562细胞，设置空白对照，各转染实验重复3次。利用双荧光素酶报告基因检测试剂盒测定海肾荧光素酶活性，并按萤火虫荧光素酶活性进行均一化处理，数据统计分析。
结果测序结果显示，成功构建了分别包含BSG rs 8259 TT或BSG rs 8259 AA位点的重组psiCHECK-2质粒。双荧光素酶报告基因检测结果表明，miR-492 mimic浓度大于100nmol/L时，对psiCHECK2-BSG-T有显著抑制作用。而mir-492 mimic对psiCHECK-BSG-A无抑制作用。
结论miR-492可能参与了调控BSG rs 8259 TT基因型个体红细胞OK抗原的表达。