【摘 要】
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采用研磨/冻融和SDS/蛋白酶K热处理以及CTAB处理等理化方法,直接从太湖流域土壤样品中抽提得到微生物总基因组DNA.所得粗DNA用透析袋法以及Nucleaotrap suspension DNA纯化试
【机 构】
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江南大学工业微生物中心和工业生物技术教育部重点实验室,江苏无锡,214036
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采用研磨/冻融和SDS/蛋白酶K热处理以及CTAB处理等理化方法,直接从太湖流域土壤样品中抽提得到微生物总基因组DNA.所得粗DNA用透析袋法以及Nucleaotrap suspension DNA纯化试剂盒进行了纯化.纯化过的DNA能够满足常用限制性内切酶酶切、细菌16S rDNA通用引物和随机引物进行PCR扩增的要求.将所得纯品DNA经过EcoR I部分酶切之后与酶切并脱磷酸的pSK-空载体连接,再以大肠杆菌JM109为宿主细胞初步构建了土壤微生物基因组文库. 图6 参7
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