【摘 要】
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用质粒表达载体pSPORT-1构建了猪囊尾蚴cDNA文库.将已构建好的cDNA表达文库用SOC按一定比例稀释后,均匀涂布于LB板(Amp+)上,37℃培养箱中倒置培养过夜.将生长良好的菌落转印
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划)
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用质粒表达载体pSPORT-1构建了猪囊尾蚴cDNA文库.将已构建好的cDNA表达文库用SOC按一定比例稀释后,均匀涂布于LB板(Amp+)上,37℃培养箱中倒置培养过夜.将生长良好的菌落转印于NC膜,并将此膜置于加有IPTG的LB板上,37℃诱导培养4h.取下NC膜,在氯仿蒸气中熏蒸15min后,在裂解液中过夜裂解.经洗膜、封闭,加人囊尾蚴阳性血清;再洗膜、封闭,加羊抗人IgG-HRP,与底物作用后,初步筛选得到了阳性克隆.对可疑阳性克隆,用同样方法反复筛选,直到完全确定为止.
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