氯霉素人工抗原合成的优化及多克隆抗体的制备

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采用重氮法将半抗原氯霉素(CAP)分别与载体牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)偶联,制备氯霉素免疫抗原及包被抗原。采用二次回归正交旋转方法对抗原的合成进行优化。紫外光谱、红外光谱鉴定结果表明偶联成功。偶联物的结合比为18,蛋白质质量浓度达2.53mg/mL。用优化的氯霉素免疫抗原,按一定的时间规律对小鼠进行免疫,获得特异性氯霉素多克隆抗体。应用蛋白质电泳和间接ELISA法检验血清中IgG抗体的产生情况。小鼠第4次免疫后抗体效价最高达218700,竞争性达20.48%。经检测,获得的血清样品效价较高。
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