【摘 要】
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目的 探讨脂联素(APN)通过调控分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)及相关通路对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌肥厚的作用及机制.方法 出生3d Wistar大鼠中分离出原代心室肌细胞(NRVMs).采用免疫荧光法检测NRVMs的骨架蛋白α-SMA的表达.将提取的NRVMs分为空白组、1 nmol/L组、10 nmol/L组、100 nmol/L组、500 nmol/L组,检测不同浓度AngⅡ对NRVMs的作用.将NRVMs分为空白组、AngⅡ组、APN+AngⅡ组、AngⅡ+APN+si-sFRP2组
【机 构】
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山东第一医科大学附属中心医院心血管内科,山东 济南250013
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目的 探讨脂联素(APN)通过调控分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)及相关通路对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的心肌肥厚的作用及机制.方法 出生3d Wistar大鼠中分离出原代心室肌细胞(NRVMs).采用免疫荧光法检测NRVMs的骨架蛋白α-SMA的表达.将提取的NRVMs分为空白组、1 nmol/L组、10 nmol/L组、100 nmol/L组、500 nmol/L组,检测不同浓度AngⅡ对NRVMs的作用.将NRVMs分为空白组、AngⅡ组、APN+AngⅡ组、AngⅡ+APN+si-sFRP2组、AngⅡ+APN+LiCl组、APN组、SP600125+AngⅡ组以及SB203580+AngⅡ组检测APN对AngⅡ作用的影响.采用Western blotting法检测各组细胞sFRP2的表达量以及Wnt/β-catenin、p38/JNK通路的激活.采用qPCR法检测各组细胞心肌肥厚相关指标以及sFRP2的表达水平.结果 在NRVMs中加入AngⅡ24 h后,与空白组相比,1 nmol/L组、10 nmol/L组、100 nmol/L组、500 nmol/L组ANP、BNP的表达升高(FANP=27.30,P=0.002;FBNP=38.18,P=0.002),p-JNK和p-p38表达均升高(Fp-JNK=57.65,P<0.001;Fp-p38=8.880,P=0.018),sFRP2的表达下调(FAngⅡ=47.53,P<0.001).加入APN预处理1 h后,与单加AngⅡ组相比,APN+AngⅡ组NRVMs心功能损伤标志物ANP、BNP的表达降低(FANP=101.8,P<0.001;FBNP=51.14,P<0.001),sFRP2的含量上调(F=88.93,P<0.001),同时Wnt/β-catenin(F=41.33,P=0.006)及p38/JNK(Fp38=73.42,P<0.001;FJNK=39.28,P=0.002)通路的激活被抑制.加入p38/JNK通路抑制剂后,能够达到APN预处理的效果(FANP=122.9,P<0.001;FBNP=202.3,P<0.001).结论 APN可能通过上调sFRP2,抑制Wnt/β-catenin、p38/JNK通路的激活,从而抑制AngⅡ诱导的心肌肥厚.
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