PKH26标记示踪人脐带间充质干细胞在肝硬化大鼠体内的迁移

来源 :中华肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mailyangli
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目的 用红色荧光染料PKH26标记人脐带间充质干细胞(hUCMSCs),观察PKH26标记的hU CMSCs在肝硬化大鼠体内的迁移情况. 方法 hU CMSCs经复苏培养后,用PKH26对细胞进行标记,测定标记率和单次标记后荧光可检测时长;显微镜下观察标记后细胞形态,四甲基偶氮唑盐法测定细胞生长曲线.将PKH26标记的hU CMSCs通过大鼠尾静脉分别移植给正常大鼠和肝硬化大鼠;48 h后取肝组织做冰冻切片,荧光显微镜下观察hUCMSCs在大鼠体内的迁移情况.数据采用完全随机设计两组均数t检验进行分析. 结果 PKH26对hUCMSCs的标记率为100%,标记后细胞生长状态良好,细胞形态与未标记细胞无明显差别,均为长梭形成纤维样细胞;两组细胞各时间点的吸光度值的差异亦无统计学意义(P>0.05),细胞增殖未见明显影响;第3~5天细胞生长速度最快,为对数生长期,在对数生长期中,对照组的细胞倍增时间为(2.22±0.04)d,标记组的细胞倍增时间为(2.20±0.04)d,两组的差异无统计学意义(P=0.53).体外单次标记后荧光至少可维持20 d;移植给大鼠后,PKH26标记的hUCMSCs主要分布于硬化肝脏的汇管区、血管及假小叶周围,脾脏、肺亦有少量分布.结论 PKH26是标记hUCMSCs的理想荧光染料,PKH26标记技术可用于hU CMSCs移植治疗肝硬化时的细胞示踪研究。

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